乳腺增生病动物模型造模方法地研究进展.pdfVIP

其他 ·545· 乳腺增生病动物模型造模方法的研究进展 徐芳芳，王群 上海市中医药大学附属上海市中医医院 200071 摘要：目的：通过对乳腺增生病动物模型造模方法资料的收集来了解该领域的最新进展并为进一步研究 提供方向。方法：以实验研究、乳腺增生病、小叶增生、非典型增生、癌前病变为关键词，检索CKNI 数据库，得到169篇文献，对文献所列造模方法进行分类后归纳。结果g实验动物多选用大鼠，乳腺增 生病的造模方法主要是注射外源性激素；非典型增生造模方法常用DMBA进行诱导。除此之外，还有 病证结合的造模方法。结论：雌二醇联合少量黄体酮法造模因其可比性强，可重复性强、稳定可靠，方 法简便，是最常用的造模方法，但注射剂量和天数各不相同，至今尚无定论：对于非典型性增生DMBA 虽然有效、可靠但易致全身毒性，导致死亡，因而剂量上有待探讨；而用夹尾法制造肝郁证模型和测得 血液动力学指标的变化即能说明血瘀证的存在是较为肯定的病证结合造模法。 关键词：乳腺增生病，造模方法，非典型增生，病证结合，雌孕激素 概述 乳腺增生病是一种多发病、常见病。随着当今社会工作压力增大，生活节奏加快，乳腺增生病的发 病率已呈逐年升高的趋势。患者常有月经来潮前乳房胀痛，影响女性的生活质量，并有一定的癌变率， 因而乳腺增生病治疗方法的研究已越来越受重视。我们在进行临床研究的时候，常常需要进行动物实验， 为了得到可靠的数据，成功率高、并可重复的乳腺增生病动物模型是进一步实验成功的关键。 研究表明：乳腺增生病是激素依赖性疾病，其发病与雌孕激素比例失调有关，绝大多数妇女存在雌 激素(E2)绝对或相对偏高，而孕激素(P)偏低。雌激素可刺激乳腺上皮细胞和间质细胞增生，而孕激素则可 一定程度上对抗雌激素作用，促进腺泡增生。因而不论是哪种造模方法，一般都联合运用雌孕激素。 一、动物的选择 根据实验动物选择的基本原则：与人体结构、功能、代谢及疾病特征相似的动物。家兔和大鼠的乳 腺组织形态、结构都与人体相似，因而常常被采用。而由于大鼠价格低廉，饲养成本亦较低，同样的经 费可以获得更大的样本，因而更多的人选用大鼠做为实验对象。 二、 典型乳腺增生病模型的造模方法 乳腺增生病的造模方法可分为两大类：一类是手术摘除卵巢后给药，一类是保留卵巢直接给药。 (一)手术摘除卵巢后给药 倪瑾等用青紫兰家兔30只，雌性，未孕，麻醉后切除双侧卵巢，1周后，肌注雌二醇0．3mg／kg，隔 日一次，共30天，造模。实验结束后处死，在光镜、电镜下观察乳腺组织，发现其病理分型属于囊性 小叶增生，主要是小导管和腺泡显囊性扩张增生，伴上皮增生，小叶和腺泡数目增多，因而体积增大， 说明造模成功IIJ。 手术卵巢摘除可以避免内源性雌、孕激素的影响，可精确控制雌、孕激素在体内的含量，但手术成 本较高，且对动物有一定的创伤，容易感染，也有可能带入外源性干扰因素，故卵巢摘除后给药的方法 较少被采用。在保留卵巢的造模方法中通过外源性激素来扰乱动物体内性激素的分泌，诱导乳腺组织增 生从而达到造模的目的。有单用雌二醇法、雌孕激素联合法等。 (二)保留卵巢直接给药 1．单用雌激素 病理形态，发现正常组乳腺导管上皮细胞排列规则，管腔无扩张，小叶较少，小叶中腺泡数3_4个，核 仁不明显。模型组乳腺导管上皮细胞增生明显，局部呈乳头状或合体状并层数增多，核仁明显，管腔明 显扩张，内有脱落上皮细胞及分泌物，小叶明显增多，小叶中腺泡数增生明显，间质出血、水肿，纤维 ·546· 其他 组织增生。实验表明当大鼠乳腺组织形态表现为明显增生时，乳腺ER、PR病理积分也显著升高12J。 2．雌孕激素联合 (1)小剂量 肌肉注射黄体酮5mg／kgd,连续5天，处死后进行乳腺组织的病理学检查：正常组为增生型乳腺，导管 腔小，上皮细胞低矮，小叶较小，腺泡增生不明显。模型组乳腺组织受E2及P影响，乳腺导管显著扩 大，上皮增生明显，小叶及腺泡增大。另外，正常组和模型组在乳头的高度以及血清E2变化方面有显 著差异、而血清P以及剐P均无显著差异【3】o 组【4】。 (2)中等剂量 注苯甲酸E230天。处死后在光镜下观察各组大鼠乳腺腺体，