不同抗菌肽产品抗菌能力对比的研究.pdfVIP

2014·饲躺做生态制剂应用技7It国际硼讨会 不同抗菌肽产品抗菌能力对比研究 ■ 李富伟骆骅 02609) (北京科为博生物技术研究院，北京1 抗菌肽目前在饲料和养殖业中已经开始初步使 0．59、NaCl1．09，加蒸馏水至100mL，琼脂1．59， 用，抗菌肽核心作用是能够在饲料和动物肠道中起到 pH7．0，121℃，灭菌20rain。 抑菌抗菌的效果，减少病原菌增殖，减少动物发病， ③LB液体培养基：蛋白胨1．09，酵母浸粉0．59， NaCl 减轻腹泻，减少抗生素的使用，提高养殖效果。科为 1．09，加蒸馏水至100mL，pH7．0，121℃， 博生物技术研究院在抗菌肽研究方面取得了大量研究 灭菌20min。 成果并成功在市场推广应用，推动安全健康畜牧业发 ④MRS培养基lL：蛋白胨109、牛肉膏59、 lmL、磷酸氢二 展。 酵母膏59、葡萄糖209、吐温一80 钾29、乙酸钠59、柠檬酸二铵29、硫酸镁0．29、 1试验目的 采用管碟法对比分析科为博公司筛选到的抗菌 再加入159琼脂粉。培养基经高压灭菌。 微生物CSl0以及从市场上收集的3种抗菌肽产品的 8．09， ⑤磷酸缓冲液：K2HP042．09、KH2P04 抗菌能力研究。 加蒸馏水定容至1000mL，过滤，121℃，灭菌 20min。 2试验样品及材料 ⑥培养皿，内径约95mm，底部平整光滑I牛津 2．1试验样品 杯、lmL移液管、酒精灯、镊子。 ①科为博筛选到的抗菌微生物CSl0l ⑦指示菌悬液：大肠杆菌原菌种接种于LB液体 ②从市场上收集的3种抗菌肽产品，产品编号分 培养基中，于37(2摇瓶培养16～18h。 别A、B、C。 3操作步骤 2．2试验材料 ①底层琼脂：1．59琼脂，加蒸馏水至100mL， 3．1指示菌悬液的制备 121℃，灭菌20rain。 大肠杆菌原菌种接种于LB液体培养基中，于 ②LB固体培养基：蛋白胨1．09、酵母浸粉 37(2摇瓶培养16～18h。取出培养好的指示菌菌悬液， 201a·饲斟傲生态制剂应用技7It国际研讨畲 于10mL上层培养基中加入10“L的大肠杆菌作为指A：抗菌肽A产品的10％溶液； 示菌。 B：抗菌肽B产品的10％溶液； 3．2抗菌肽供试品的制备 C：抗菌肽C产品的10％溶液。 CSl0菌种接种于装有30mLMRS液体培养基 4试验结果 的100mL三角瓶中，于37℃培养16～18h。取出 培养好的菌液，12000rpm，离心15min，取出上清抗菌肽试验结果如图l所示，C$10菌液产生的 液备用。 抑菌圈明显大于3种抗菌肽产品所产生的抑菌圈。试 分别称取A、B、C