Ephrin-A3在脂多糖处理后星形胶质细胞增殖中的表达.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(9)：1697—1703 · 1697 · [文章编号] 1000—4718(2011)09—1697—07 Ephrin—A3在脂多糖处理后星形胶质细胞增殖中的表达 王继先， 张博爱 ， 刘 宇， 何 昕， 李 林， 张 勤 (郑州大学第一附属医院神经内科 ，河南 郑州450052) [摘 要】 目的：探讨脂多糖对大鼠大脑皮层星形胶质细胞(As)增殖的影响、ephrin—A3在其中的表达变化 及其可能机制。方法 ：提取新生大鼠大脑皮层As并纯化培养，随机分为对照组，脂多糖 (10mg／L)干预30min组、 6h组、24h组、48h组和72h组，采用倒置相差显微镜观察 AS形态学变化，MTF法检测细胞活性，AO／EB荧光染 色检测细胞凋亡和坏死情况 ，免疫荧光测定不同时点ephrin—A3和胶质细胞原纤维酸性蛋 白(glialfibrillaryacidic protein，GFAP)的表达变化，ELISA法测定细胞培养液内炎症因子肿瘤坏死因子d(TNF一 )和白细胞介素6(IL一 6)的变化。结果：在脂多糖作用的不同时点，与对照组相比，作用24h、48h、72h的细胞活性显著升高，凋亡率显 著下降，ephrin—A3和GFAP表达显著升高，培养液内TNF一0【和IL一6显著升高。结论：脂多糖可以促进大 鼠大 脑皮层AS增殖。Ephrin—A3在脂多糖诱导的As增殖中的表达增高，其表达增加可能与炎症因子有关。 [关键词] Ephrin—A3；脂多糖类；星形细胞 [中图分类号] R741．02 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．09．007 Expressionofephrin—A3inUp0pOlysaccharide—inducedproliferationof astrocytes WANGJi—xian，ZHANGBo—ai，LIUYu，HEXin，LILin，ZHANGQin (DepartmentofNeurology，TheFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052，China．E—mail： zhangboaidoctor@ 163．corn) [ABSTRACT] AIM ：Toexploretheeffectsofephrin—A3expressionontheproliofrationofastrocytesinducedby lipopolysaccharide(LPS)．METHODS：Astrocytesfromcerebralcortexofnewborn ratswereculturedandpurified．The cellswereexposedtoLPSatthecon ntration0f10mg／Landdividedinto6groupsatrnadom：controlgroup (without U )nadthegroupsofexposuretoLPSfor30min，6h，24h，48hand72h．Themorphologicalchangesoftheastrocytes wereobservedunderinvertedphase—contrastmicroscope．Thesurvivalrateandapoptoticrateofastrocytesweremeasured byMTImethod andAO／EB staining，respectively．Th e expression ofephrin —A3na d glial fibrillary acidicprotein (GFAP)WasmeasuredbyfluoresceinstainingwithCY3．ThechangesoftheinflammatoryfactorsTNF—Or,nadIL一6in theculturesupematantw