ERK信号通路在樨皮素促大鼠MSCs成骨分化中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(8)：1477—1481 · 1477 · [文章编号] 1000—47l8(2012}08—1477—05 ERK信号通路在樨皮素促大鼠MSCs 成骨分化 中的作用米 奉水旺 ， 杨 丽 ， 王攀攀 ， 李淑琴 ， 汪 甜 ， 尹素娟 ， 张荣华 (暨南大学 药学院中药学教研室，医学院，广东 广州510632) 【摘 要] 目的：观察细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在槲皮素(QUE)促进sD大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)成骨分化过程中的作用。方法：(1)用0．01I~mol／L、0．1I~mol／L、1Fanol／L、10~mol／L和 100i~mol／LQUE 干预MSCs，MTr法检测各浓度 QUE对MSCs增殖的影响，碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒检测各浓度QUE对 MSCs ALP表达的影响；(2)用ERK1／2抑制剂干预后，加人QUE，用ALP测定试剂盒检测ALP的表达，ELISA法检测 I型 胶原(ColI)和骨钙素(BGP)的表达 ，Westernblotting检测 ERK1／2的表达，荧光定量 PCR检测转化生长因子 Bl (TGF—B)mRNA、骨形成蛋白2(BMP一2)mRNA和核心结合因子d1(Cbfa1)mRNA表达。结果：(1)0．1~mol／L、 1Ixmol／L和 10i~nol／LQUE剂量依赖性地促进 MSCsALP的表达 ，同时能促进 MSCs的增殖；(2)与空 白组相比， QUE组ALP、BGP和ColI表达均增加 (P0．01)，加入ERK1／2抑制剂后，磷酸化的ERK1／2表达减少(P0．05)， 同时ALP、BGP和c0lI表达降低 (P0．01)；(3)与空白组比较 ，QUE组TGF—B】mRNA、BMP一2mRNA和Cbofd mRNA的表达均增加 (P0．05)，加入 ERK1／2抑制剂后这3个基因的表达都下降(P0．05)。结论：一定浓度的 QUE能促进MSCs的增殖和成骨分化，ERK通路的激活在此过程中起到了重要的作用。 [关键词] 骨髓间充质干细胞；成骨分化；有丝分裂原活化蛋白激酶类；信号通路 (中图分类号】 R363 【文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．08．025 TherolesofERK signalingpathway in osteogenicdifferentiation ofrat MSCspromotedbyquercetin FENG Shui—wang，YANG Li，WANG Pan—pan ，LIShu—qin ，WANG Tian ，YIN Su—iuan 。ZHANG Rong—hua‘ (DepartmentofTraditionalChinesemedicine，PharmacyCollege，SchoolofMedciine，JinanUniversity，Guangzhou 510632，China．E—mail：tzrh@ u．edu．Cll,) [ABSTRACT] AIM：Tostudytherolesofextracellularsignal—regulatedkinase(ERK)singalpathwayinthe processofostcogeniedifferentiationinratmesenchymalstemcells(MSCs)promotedbyquercetin(QUE)．METHODS： TheoptimalconcentrationofQUEforpromotingosteogenicdffierentiationofratMSCswasdeterminedbyMTYandalkaline phosphatase(APL )detection．TheactivityofAPL wasdetectedbytheAPL detectionkit．Theexpress