H2S抑制Ang+II引起的神经元活性氧水平升高的机制研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(5)：865—869 · 865 · 【文章编号】 1000—4718(2012)05—0865—05 H2S抑制Ang·II引起的 神经元活性氧水平升高的机制研究木 马 红， 于海云， 于 燕， 曹冬青， 黄 莺， 金惠铭， 朱依纯， 卢 宁 (复旦大学上海医学院生理与病理生理学系，上海 徐汇200032) [摘 要] 目的：探讨硫化氢 (H：s)对血管紧张素 II(angiotensinII，AngII)所致延髓神经元活性氧(reactive oxygenspecies，rtos)水平变化的影响，以及H：S抗氧化应激的相关机制。方法：采用原代培养的延髓神经元，分组 如下：对照组、AngII处理组、硫氢化钠 (NaHS)处理组、NariS+AngII处理组和 PD98059(P—ERK1／2蛋 白的抑制 剂)+AngII处理组。选用二氢乙啶(DHE)荧光探针法测定各组神经元胞 内的ROS水平，Westernblotting检测 ERK1／2和P—ERK1／2蛋白的表达量，CCK一8法测定神经元的活性。结果 ：AngII(终浓度为 100nmol／L)引起神 经元ROS水平升高；Naris(50—200Izmol／L)明显抑制AngII引起的神经元ROS水平升高，但单独给予NariS并不 影响神经元ROS水平；P—ERK1／2蛋白的抑制剂PD98059也能明显抑制AngII引起的神经元ROS水平的升高；适 宜作用浓度的NariS能够显著降低AngII引起的神经元P—ERK1／2蛋白表达。结论：HS能够显著抑制AngII引 起的神经元ROS水平升高，其作用机制与 MAPK家族中P—ERK1／2蛋 白的表达有关。H：S可能通过降低 P— ERK1／2的表达量而产生抗氧化应激作用。 [关键词】 硫化氢；血管紧张素II；神经元；活性氧簇 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．05．017 Hydrogen sulfide suppressestheincrease in reactive oxygen speciesin neuronsinducedbyangiotensin IIviaERK1／2signalpathway MA Hong，YU Hai—yun，YU Yan，CAO Dong—qing，HUANGYing，JINHui—ming， ZHU Yi—chun．LU Ning (DepartmentofPhysiologyandPathophysoiloyg ，FudanUniversityShanghaiMedicalCollege，Shanghai200032，China．E — mail：luning7@shmu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofhydrogensulfide(H2s)onthereactiveoxygenspecies(ROS) levelinmedullaryneuronsinducedbyangiotensinII(AngII)．METHODS：Primarilyculturedratmedu~aryneurons weredividedinto5groupsasfollows：controlgroup，AngIIgroup，sodiumhydmsuflide(Naris)group，NaHSwithAngII group，andPD98059(aninhibitorofP—ERK1／2)wihtAngIIgroup．ROSproductionwasmeasuredwithdihydroethidium (DHE)staining．TheexpressionofP—ERK1／2nadERK1／2wasdeterminedbyWesternblotting．Theactivityofneurons wasdetecte