PSMA对JNK%2fSAPK通路的激活及对前列腺癌细胞凋亡的调控.pdfVIP

理杂志 ChineseJournalofP · 785 · [文章编号] 1000．4718(2014)05．0785．07 PSMA对 JNK／SAPK通路的激活及 对前列腺癌细胞凋亡的调控 水 黄 海 ， 赖义明。， 何 旺’， 董 文’， 朱定军。， 张一鸣。， 刘 皓 ， 于 浩’， 毕 良宽 ， 林天歆。， 黄 健 。， 郭正辉’， 杜 涛 (中山大学孙逸仙纪念医院 。泌尿外科 ，产前诊断中心，广东 广州 510120) [摘 要] 目的：探‘讨前列腺特异性膜抗原(PSMA)是否通过c．Jun氨基末端激酶／应激激活的蛋自激酶(JNK／ SAPK)通路对前列腺癌细胞凋亡进行调控。方法：利用前期研究中建立的高效阻断PSMA表达的shRNA慢病毒载 体 ，阻断前列腺癌细胞中PSMA的表达作为实验的干扰组；同时利用构建的PSMA载体转染前列腺癌细胞，促进前列 腺癌细胞中PSMA的表达作为阳性实验组；不做任何处理的细胞株作为空白组；加入JNK／SAPK抑制剂 SP600125作 为阴性对照。Westernblotting及免疫细胞化学方法观察各组细胞 p-JNK／SAPK的表达量，CCK-8法检测细胞生长情 况 、流式细胞术检测细胞周期及凋亡。结果：Westernblotting及细胞免疫化学提示抑制PSMA表达后，p-JNK／SAPK 表达水平下降；增强PSMA表达后p-JNK／SAPK表达水平上升；在SP600125作用下，3组细胞 p-JNK／SAPK均处于较 低水平，且彼此无明显差异。CCK-8法和流式细胞术检测细胞周期提示PSMA表达受抑制后细胞增殖能力下降，细胞 S期百分比减少；增加PSMA表达，细胞增殖能力增强，s期百分比增加：在SP600125作用下，3组细胞增殖和S期百 分比均处于低水平，无明显差异。在抑制PSMA表达组中，前列腺癌细胞的凋亡率明 升高；而在增强PSMA表达组． 细胞凋亡率明显降低；加入SP600125后，细胞凋亡率均低于常规培养组。结论：PSMA通过上凋JNK／SAPK信号通路 对前列腺癌细胞的增殖、细胞周期及凋亡产生影响，但JNK／SAPK并不是唯一通路。 [关键词] 前列腺特异性膜抗原；前列腺肿瘤；JNK／SAPK信号通路 ；细胞周期；细胞凋1L= [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．05．003 PSMA activatesJNK／SAPK pathwayandregulatesapoptosisofprostate cancercells HUANGHal，LAIYi—ming。，HEWang‘，DONGWen，ZHUDing-jun。，ZHANGYi— ming ，LIUHao ，YU Hao。 BILiang—kuan ，LINTian—xin ，HUANGJian ，GUOZheng— ， hui．DUTao (’DepartmentofUrology。PrenatalDiagnosisCenter，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity．Guangzhou 510120，China．E—mail：dutao377@ 126．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofprostate-specificmembraneantigen(PSMA)onthec-JunN-ter- minalkinase(JNK)／stress—activatedproteinkinase(SAPK)pathwayandtheapoptosisofprostatecancercells．METH- ODS：TheshRNA lentiviralvectorwithhighefficiencywasconstructedinthepreviousstud