PSMA基因沉默的前列腺癌细胞中肿瘤转移相关基因表达的芯片分析.pdfVIP

· 980 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(6)：980—984 [文章编号】 1000—4718(2012)06—0980—05 PSMA基因沉默的前列腺癌细胞 中肿瘤转移 相关基因表达的芯片分析术 王 铸 ， 曹开源 ，何 霞 ， 冯发深 ，徐 霖 ， 关琳琳 ， 汪 杨 ， 罗燕芬 ，丘少鹏 (中山大学 临床检验标准化研究中心，中山医学院微生物教研室，附属第一医院泌尿外科，广东广州 510080) [摘 要] 目的：探讨前列腺特异性膜抗原(prostate—specificmembraneantigen，PSMA)在前列腺癌转移过程 中的作用通路。方法：针对PSMAmRNA序列设计合成siRNA序列 ，脂质体转染 LNCaP细胞特异性下调 PSMA基 因的表达，通过肿瘤转移基因芯片分析84个肿瘤转移相关基因的表达差异。结果：成功设计了siRNA序列并制备 最佳干扰效果的干扰样 ，mRNA干扰效果达到75％以上，蛋白水平干扰效果达68％以上。通过基因芯片检测发现 在下调PSMA基因表达后 ，有CDH6、CXCL12等 10个基因发生了显著上调，而CCL7、MDM2等4个基因发生显著下 调表达。结论：初步发现PSMA参与前列腺癌转移信号通路的调节，为进一步研究PSMA的生物学功能，探索前列 腺癌的转移机制奠定了基础。 [关键词] 肿瘤转移基因芯片；RNA，小干扰；前列腺特异性膜抗原 [中图分类号】 R737 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．06．004 M icroarray analysisoftumor metastasis-—related gene expression in PSMA --silencingprosattecancercells WANGZhu ，CAO Kai—yuan ，，HE Xia，，FENG Fa—shen ，，XU Lin ，，GUAN Lin一1in一，WANGYang一，LUOYan—fen一，QIUShao—peng (。ResearchCentreforClinicalLaboratoryStandard，DepartmentofMedicalMicrobiology，ZhongshanSchoolofMedi— cine，DepartmentofUrinarySurgery，theFirstAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China．E — mail：caoky@mail．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethefunctionsofprostate—specificmembraneantigen(PSMA)inprostate cnacermetastasis．METHODS：SpecificsiRNA toknockdownPSMAexpressionwasdesignedandtransfeetedintoLNCaP cells．ThetumormetastasisgenechipWas alsousedtoanalyzethedifferentialexpressionof84genesrelatedtocancerme— tastasis．RESULTS：SpecificsiRNA wassuccessfullydesignedandconstructedandthegeneexpressionofPSMA inLN— CaPcellswasknockeddown．TheRNAiefficiencywasmorethan75％ atmRNA levelandmorethan68％ atproteinlev— e1．Theresultsofthetumormetastasisgenechipindicatedthat10geneswereup—regulated(suchasCDH6andCXCL12) and4genesweredown—regulated(suchasCCL7andMD