siRNA下调RRM2抑制人乳腺癌细胞增殖与迁移及其裸鼠皮下移植瘤的生长.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(6)：1001—1005 [文章编号] 1000-4718(2012)06—1001—05 siRNA下调 RRM2抑制人乳腺癌细胞增殖与 迁移及其裸 鼠皮下移植瘤 的生长 郭绍文 ， 林 韵 ， 李泽民 (。上海中医药大学附属曙光医院病理科，上海 200021；上海市东方医院肿瘤科，上海 200120) [摘 要] 目的：探讨 siRNA下调核糖核苷酸还原酶 M2(ribonucleotidereductaseM2，RRM2)基因对人乳腺 癌细胞MCF一7体外增殖 、迁移和体内成瘤的影响。方法：实时定量荧光PCR (real—timePCR)及Westernblotting 技术检测人乳腺癌细胞MCF一7和人正常乳腺上皮细胞 MCF—IOA中RRM2mRNA及蛋白的表达；用合成的siR- NA—RRM2不同时点和不同剂量转染MCF一7细胞 ，用real—timePCR检测对RRM2基因的沉默效率；用CCK一8 方法检测细胞增殖；用Transwell细胞迁移系统检测siRNA—RRM2对 MCF一7细胞迁移能力的影响；裸鼠移植瘤实 验检测 siRNA—RRM2沉默MCF一7细胞的RRM2基因后对肿瘤生长的影响。结果：MCF一7细胞RRM2mRNA和 蛋白比MCF一10A细胞高表达；用siRNA—RRM2转染 MCF一7乳腺癌细胞能时间及剂量依赖性下调RRM2基因 表达；CCK一8方法结果显示下调RRM2基因会时间及剂量依赖性抑制MCF一7细胞增殖，而人正常乳腺上皮细胞 增殖没有显著变化 ；Transwell细胞迁移系统检测显示下调RRM2基因显著抑制了MCF一7细胞的迁移能力；转染 siRNA—RRM2下调RRM2基因能显著抑制裸鼠移植瘤的生长。结论：RRM2的过表达与人乳腺癌细胞的高增殖 和迁移能力有关，抑制RRM2的功能是治疗乳腺癌的一个潜在的治疗策略。 [关键词] 核糖核苷酸还原酶 M2；RNA干扰；乳腺肿瘤 [中图分类号] R737．9 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．06．008 Knockdown ofRRM2 geneby siRNA inhibitshuman breastcancercell proliferation，migrationandtumorgrowthinnudemice GU0 Shao—wen 。LIN Yun ．LIZe—min (DepartmentofPathology，ShuguangHospitalAffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai 200021，China；DepartmentofOncology，ShanghaiEastHospital，Shanghai200120，China．E—mail：ppanaa@126． corn) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectofribonucleotidereductaseM2(艘 )geneknockdownbysiRNAon theproliferationandmigr~ionofhumanbreastcancerMCF一7cellsandthetumorgrowthinBALB／cnudemice． Ⅱ唧 - oDS：TheroRNA and proteinexpressionlevesofRRM2inhumanbreastcancercelllineMCF一7andhumannormal breastcelllineMCF一10A weredeterminedbyreal—timePCR nadWestern blotting．siRNA —RRM2wasconstructedand transfectedinto’MCF一7ceilsatdifferenttimepointsanddifferentconcentrations．Thesilencingefficie