Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013。29(7)：1202．1206 [文章编号] 1000-4718(2013)07-1202-05 Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性木 刘 宁， 孙连坤， 杨晓春， 马丽伟， 苏 静△ (吉林大学白求恩医学院病理生理学系，吉林 长春 130021) [摘 要] 目的：研究可溶性耐药相关钙结合蛋 白(sorein)在人胶质瘤细胞对顺铂敏感性 中的作用。方法： 构建pSilencer 3．1．H1-sorcinsiRNA表达质粒 ；质粒转染人胶质瘤 U251细胞；RT-PCR和Westernblotting法检测 sorcinmRNA和蛋白表达的变化 ；MTY法检测U251细胞的生存率 ；Westernblotting检测耐药相关蛋白的表达变化。 结果：经酶切和测序鉴定，成功构建pSilencerr3．1-HI-sorcinsiRNA表达载体 ；将该表达载体转染U251细胞，RT— PCR和Westernblotting结果显示osreinmRNA和蛋白表达量降低 (P0．05)；MTr结果显示，抑制osrein表达可增 强 U251细胞对顺铂的敏感性 (P0．05)；同时发现抑制 U251细胞的osrcin表达能降低耐药相关蛋 白P-糖蛋白 (P．sp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的蛋白水平 (P0．05)。结论：抑制 sorein表达增强U251细胞对顺铂的敏 感性 ，其作用机制可能与降低耐药相关蛋白P-gP和MRP1的表达有关，提示 sorein可能与胶质瘤细胞顺铂耐药有 关。 [关键词] 神经胶质瘤 ；顺铂；耐药性 ；可溶性耐药相关钙结合蛋白 [中图分类号] R739．41 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．07．010 Effectofsorcinexpressiononsensitivityofhumangliomacellstocisplatin UUNing，SUNLian—kun，YANGXiao-chun，MALi-wei，SUJing (DepartmentofPathophysiology，NormanBethuneCollegeofMedicine，朋inUniversity，Changchun130021，China．E- mail：sujing@flu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofsoreinexpressiononthesensitivityofhumangliomacellstocispl— atin．M ETHODS：pSilencerMT 3 1-H1-sorcinsiRNArecombinantplasmidwasconstructed，andtrnasfectedintohumna sli— ． omaU251ceNs．RT-PCRandWestern blottingwereusedtonaalyzetheexpressionofsorcinatmRNA nadproteinlevelsaf- tertransfection．TheviabiliytofU251cellsWasmeasuredbyMTYassay．TheproteinexpressionofP-glycoprotein(P—gP) nadmultidrugresistnace·associatedprotein1(MRP1)inU251cellsWasdetectedbyWesternblotting．RESULTS：The plasmidpSileneerMT 3 ． 1一Hl-sorcinsiRNA wassuccessfullyconstructed，nadWas confirmedbyrestrictionenzymedigestio