Sox-2基因表达的变化在小鼠EST模型药物胚胎毒性评价中的应用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(5)：985—990 · 985 · [文章编号] 1000-4718(2011)05 0985—06 Sox一2基 因表达的变化在小 鼠EST模型 药物胚胎毒性评价中的应用 许 华 ， 何 清 ， 邓淑琴 ， 查庆兵 (暨南大学 药学院，附属第一医院胎儿医学科，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：建立小鼠胚胎干细胞实验 (EST)模型，验证该模型检测胚胎毒性的有效性 ，探讨未分化基 因Sox一2表达水平的变化对药物胚胎毒性评价的作用。方法 ：体外培养小鼠胚胎干细胞 (ES)，通过形态学观察、 核型分析和碱性磷酸酶(AKP)染色等方法鉴定 ES；MIT法检测5一氟尿嘧啶(5一FU)、苯妥英钠 (DPH)和青霉素 G(penicillinG)对Es的毒性作用，RT—PCR半定量分析法检测3种药物对未分化基因Sox一2表达的影响。结果： 成功建立 EST模型。5一FU、DPH和penicillinG细胞毒性检测结果表明，其胚胎毒性依次为强、弱和无 ，与临床药 物毒性相一致。Sox一2基因表达结果显示 ，随药物浓度增高及毒性增加 ，Sox一2基因表达量逐渐高于阴性对照组， 但均低于未分化Es细胞。结论：研究结果显示 ，Sox一2基因的表达水平与药物毒性密切相关 ，可用于初步评价 EST模型中药物的胚胎毒性。 [关键词] 模型，小鼠胚胎干细胞 ；胚胎毒性；有效性 ；基因，Sox一2 [中图分类号】 R991 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．05．029 Expression ofSox -—2 in mouseembryonic stem celltestfor screening drugswithembryotoxicity XUHua，HEQing，DENGShu—qin，ZHAQing—bing (PharmacyCollege，DepartmentofFetalMedicine，TheFirstAffiliatedHospital，JinanUniversity，Guangzhou510632， China．E—mail：huax—mail@163．con) [ABSTRACT] AIM：Toestablishamodelofmouseembryonicstemcelltest(EST)toexaminethetoxiceffectof 5一fluorouracil(5一FU)，diphenylhydantoin(DPH)andpenicillinGonembryonicstemcellsandtoconfirmthevalidity ofthemodelfordetectingtheembryotoxicityofdrugs．M ETHODS：Mouseembryonicstem cellswereculturedandidenti— fledbythemethodsofmorphology，karyotypeanalysisandalkalinephosphatasestaining．Thecytotoxiceffectof5一FU ， DHPandpenicillinGweredetectedbyMTYassay．Theeffectsof5一FU．DHPandpenicillinG onSox一2 geneexpres— sionweredeterminedbysemi—quantitativeRT—PCR．RESULTS：ESTmodelwassuccessfullyestablished．Asthesame astheclinicaltoxicitiesofthe3drugs，theembryotoxicityof5一Fuwasstrong，thatofDPHwasweakandnoembryotoxici— tyofpenicillinGwasobserved．Withtheincreaseintheconcentrati