负向调控miR-9抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭.pdfVIP

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2015-08-04 发布于江西
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负向调控miR-9抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭.pdf

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中国病理生理

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(4)：640-644 [文章编号] 1000-4718(2014)04-0640-05 负向调控miR．9抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭郑朝攀，韩灵，侯伟坚，文译辉，傅然，文卫平 (中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院，中山大学耳鼻咽喉科学研究所，广东广州510080) [摘要] 目的：探讨负向调控miR-9对人鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭作用。方法：用脂质体 Lipofectami- ne 2000转染合成抑制剂的方法抑制鼻咽癌细胞miR-9表达，转染抑制对照剂作为对照组。CCK．8法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期变化；Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力；免疫印迹实验检测蛋白变化。结果：抑制鼻咽癌细胞miR-9表达后，肿瘤增殖能力降低 (P0．05)，Go／G 期细胞增多[CNE2：(57．96± 1．39)％vs(47．93±1．76)％，P0．05；CNE1：(51．24±0．88)％ (48．29±0．39)％，P0．05]，迁移距离明显缩短 [CNE2：(186．50±7．94)pinvs(427．56士15．56)Ixm，P0．05；CNEI：(139．06±16．73)肌vs(230．66±14．27)m， P0．01]，CNE2细胞中侵袭细胞数明显减少(43．00±3．17vs65．80±5．20，P0．O1)，B．连环蛋白(13-catenin)表达被抑制。结论：在鼻咽癌细胞中，负向调控miR-9可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 [关键词] 鼻咽肿瘤；miR-9；细胞增殖；肿瘤侵袭 [中图分类号] R363 [文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．40．012 Inhibition ofmiR-9expressionsuppressesproliferation，invasionandmi- grationofnasopharyngealcarcinomacells ZHENGChao—pan，HANLing，HOUWei-jian，WENYi-hui，FURan，WENWei-ping (InstituteofOtorhinolaryngologyofSunYat-senUniversity，OtorhinolaryngologyHospital，theFirstAffiliatedHospitalof SunYat-senUnivemity，Guangzhou510080，China．E—mail：wenwp@ma il．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofdown—regulatedmiR-9expressionontheproliferation，invasion andmigrationofnasopharyngealcarcinoma(NPC)cells．METHODS：HumanNPCCNE1andCNE2cellsweretrnasfect- edwiththeinhibitorofmiR-9byLipofectaminetodown-reuglatetheexpressionofmiR-9，nadthecellstransfectedwithna inhibitorcontrolwerealsosetup．ThecellproliferationnadcellcyclewereevaluatedbyCCK-8assaynadflowcytometry． ThecellinvasionnadmirgationabilitiesweredetectedbyTrnaswellinvasionnadwound—healingassays．Immunoblotting was appliedtoanalyzehtelevelsoftheproteins．RESULTS：Compraedwithcontrolrgoup，inhibitionofmiR-9expression intheNPC