霉酚酸酯对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠症状及血CD4＋CD45RA＋+T淋巴细胞的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(12)：2457—2459 - 2457 · [文章编号] 1000—4718(2009)12—2457—03 · 短篇论著 · 霉酚酸酯对实验性 自身免疫性脑脊髓炎大鼠症状及 血 CD4十CD45RA+T淋巴细胞的影响 朱正禹， 谢兆宏， 由 玮， 毕建忠 ， 王晓云 (山东大学第二医院神经内科，山东 济南250033) 【摘 要] 目的：研究霉酚酸酯(MMF)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠症状及血CD4 CD45RA T 淋巴细胞的影响。方法：用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂制成的完全抗原免疫Wistar大鼠制备EAE大鼠模型， 以生理盐水和完全弗氏佐剂注射 Wistar大鼠作为对照。造模成功且存活的大鼠为25只。随机分为4组：MMF大 剂量组 (30mg·kg～ ·d )、MMF小剂量组 (2Omg·kg～ ·d。。)、甲基强的松龙组 (30mg·kg～ ·d )、EAE组 (生理盐水)，并给予相应的药物治疗 14d。每天进行神经功能评分，14d后流式细胞术观察各组血CD4 CD45RA T淋巴细胞百分率 ，HE染色观察脑、脊髓组织病理变化。结果：与对照组相比EAE模型大鼠脑脊髓组织血管周围 有大量炎细胞浸润，神经功能评分明显增加，血 CD4 CD45RA T淋巴细胞百分数明显减少 (均 P0．o1)；与EAE 组相比，经MMF及甲基强的松龙治疗的各组大鼠神经功能评分下降，病理改变程度减轻，血CD4CIM5RA T淋巴 细胞百分数增加 (均P0．01)；且大剂量 MMF组疗效优于小剂量MMF组和甲基强的松龙组 (均P0．01)；小剂 量MMF组和甲基强的松龙组疗效差异无显著。结论：MMF通过上调 CIM CIM5RA T淋巴细胞比例发挥免疫抑 制作用，不同剂量间疗效差异显著。 [关键词] 霉酚酸酯 ；多发性硬化；自身免疫性；脑脊髓炎 [KEYWORDS] Mycophenolatemofetil；Multiplesclerosis；Autoimmune；Encephalomyehfis [中图分类号] R744．5 [文献标识码] A 多发性硬化症(multiplesclerosis，MS)是发生在中枢神经 周龄，由山东大学实验动物中心提供 ；健康雌性豚鼠l5只，重 系统的慢性脱髓鞘疾病 ，其可能的发病机制是 CD4T淋巴 350—400g，由济南中兴旺养殖中心提供。均于山东大学第 细胞针对 自身髓鞘抗原发生的免疫反应…。实验性 自身免 二医院实验动物中心动物房在恒温 22℃、相对湿度65％一 疫性脑脊髓炎 (experimentalautoimmuneencephalomyelitis， 70％、光照周期 12h环境中，用标准混合饲料 (由山东大学实 EAE)的病理学、免疫学和临床表现与 MS极为相似，因而成 验动物中心提供)适应性饲养 1周后进入实验。 为公认的研究MS免疫病理学机制及其实验性治疗的最佳动 1．2 主要试剂与仪器 MMF(上海罗氏制药有限公司)；甲 物模型 J。CD45RA和CD45RO是白细胞共同抗原 C1M5的 基强的松龙 (大连辉瑞制药有限公司)；百 日咳杆菌抗原 (内 2种亚型，是区分T细胞中初始和记忆细胞的较理想标志 J， 含百 日咳杆菌4．2×10”／L)由中国药品生物制品检定所提 CD4CD45RO T细胞也称辅助诱导细胞，再次被抗原激活后 供 ；CD4一FITC单标抗体、CD4一FITC／CD45RA—PE双标抗 迅速增殖，而CIM CD45RA T细胞称 Naive细胞或抑制诱导 体以及相应的对照抗体 (BD)。 细胞。有研究发现 ，在MS患者中可观察到CD4C‘D45RA 2 方法 T细胞数量下降，CIM CD45RO T细胞增高的现象。霉酚酸 2．1 EAE大鼠模型制备 豚 鼠麻醉后予以生理盐水左心 酯(mycophenolatemofetil，MMF)是 1种选择性抑制T、B淋巴 室灌注，迅速取其脊髓，加入等量生理盐水，制成50％全脊髓 细胞增生的新型免疫