膜型基质金属蛋白酶-1在黏着斑激酶相关非激酶调控肝星状细胞胶原代谢中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysio~lo~2009 (12；! 二 ! · 2l55 · [文章编号] 1000—4718(2009)11—2155一o4 膜型基质金属蛋 白酶 一1在黏着斑激酶相关非激酶 调控肝星状细胞胶原代谢中的作用 魏 娟， 张晓岚 ， 敦志娜， 赵春洪， 申建刚， 霍晓霞， 安君艳 (河北医科大学第二医院消化科，河北省消化病重点实验室，河北省消化病研究所，河北 石家庄050000) [摘 要] 目的：探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞 (HSC)膜型 基质金属蛋白酶一1(MT1一MMP)表达的影响并探讨 MT1一MMP在FRNK调控HSC胶原代谢中的作用。方法：应 用体外细胞培养技术，脂质体介导法进行FRNK质粒瞬时转染；采用Westernblotting法测定FRNK蛋白在瞬时转染 时相应的表达，鉴定转染效果；分别应用Westernblotting和RT—PCR方法测定MT1一MMP在HSC中的相应表达。 结果：FRNK质粒成功转染HSC，于转染48h时，FRNK蛋白表达最强，P0．05；FRNK转染后在基因水平上：MT1一 MMPmRNA表达明显增加；翻译蛋白水平上：FRNK质粒转染HSC48h后，MTI—MMP蛋白表达量显著升高。结 论：脂质体介导下FRNK质粒转染，可使外源性FRNK在HSC内大量表达，FRNK可能通过上调MTI—MMP值来抑 制HSC胶原合成。 [关键词] 肝星状细胞；黏着斑激酶；黏着斑激酶相关非激酶；膜型基质金属蛋白酶 一1；胶原；肝硬化 [中图分类号] R363 [文献标识码] A EffectsofM T1一M MP oncollagenmetabolism regulatedbyFRNK inhe— paticstellatecells WEIJuan，ZHANGXiao—lan，DUN Zhi—lla，ZHAOChun—hong，SHEN Jian—gang， HUO Xiao—xia．AN Jun—yan (DepartmentofGastroenterology，TheSecondHospitalofHebeiMedicalUniversity，HebeiKeyLaboratoryofGastroenterolo— gY，HebeiInstituteofGastroenteroloK)，Shijiazhuang050000，China．E—mail：xiaolanzh@126．corn) IABSTRACTIAIM ：ToinvestigatetheeffectofFAK—relatednon—kinase(FRNK)ontheexpressionofmem． brane～typematrixmetalloproteinase一1(MT1一MMP)inhepaticstellatecells(HSC)．METHODS：FRNKweretrans— fectedintoHSCsbycationicliposomemethod．TheproteinlevelsofFRNK inHSCwereassayedbyWestern blotting．The levelsofMTI—MMPweredeterminedbyRT—PCR formRNA and byWestern blottingofrprotein．respectively．RE- SULTS：Theup—regulatedexpressionofFRNK proteinwasobservedanditwasat48haftertransfectionthattheFRNK proteincontentwasthehighest(P0．05)．TheexpressionsofMT1一MMPmRNAandproteinwerealsoup—reuglatedby thetransfectionofFRNK．anditwasat48haftertransfectionthattheMTI—MMP proteincontentwassi