胚胎海马来源干细胞移植治疗缺血性脑梗死的研究.pdfVIP

· 1474· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(8)：1474-1480 [文章编号] 1000-4718(2009)08—1474—07 胚胎海马来源干细胞移植，厶口7·J缺血性脑梗死的研究 李 欣 ， 廖新学 ， 荆小莉 ， 杨春涛 ， 熊 艳 ， 廖晓星 ， 冯鉴强 (中山大学附属第一医院 急诊科 2心内科 ，高血压血管病科，医学院生理教研室，广东 广州510080) [摘 要] 目的：对脑梗死大鼠进行胚胎海马来源的干细胞移植治疗，观察其能否在梗死灶部位分化为成熟 的神经元而发挥神经替代作用，并最终改善动物的肢体功能。方法：从绿色荧光蛋白(GFP)转基因sD胚胎大鼠 的海马提取细胞进行体外培养，免疫荧光染色观察这些细胞的特征。光化学法制作大脑皮层局灶缺血梗死模型， 即光血栓皮层损伤(PCI)。PCI后 1d将20只sD大鼠随机分为干细胞移植组和对照组，前者在梗死灶附近植入胚 胎海马来源的干细胞，而后者不进行干细胞移植。在PCI后 1、7、14、21d，用旋转实验对动物的肢体功能进行测试 和评分。在PCI后3周和 12周，以抗神经元核抗体(NeuN)染色成熟的神经元，观察移植干细胞的存活及其分化为 各种亚型神经细胞的情况。结果：来自SD大鼠胚胎海马的细胞明显表现出神经干细胞的特征。移植的细胞可以 在脑梗死动物模型中至少存活 l2周，并能分化为成熟神经元、星形胶质细胞等亚型的神经细胞。与移植后3周相 比，12周时的NeuN ／GFP密度和移植物体积均有所减少 (P0．05)。旋转实验结果表明，在 PCI后 7、14、21d， 移植组动物在平衡木上的停留时间均显著长于对照组 (P0．O1)。结论：来源于胚胎海马的细胞具有神经干细胞 特征，其被移植入脑梗死灶周围后能存活 12周以上，并可以分化为成熟的神经细胞，这可能与动物运动功能的改 善有关。该结果提示由移植物分化的神经细胞可能对受损宿主细胞发挥了替代作用。 [关键词】 神经干细胞；脑梗死；移植；海马 [中图分类号] R651．105 [文献标识码] A Survivaland neuronaldifferentiati0n 0ftransplanted stem cellsderived from embryonichippocampusin adultratswithstrokelesions LIXin ，LIAO Xin—xue-一，JING Xiao—li，YANG Chun—tao ，XIONGYan ，LIAO Xiao～xing，FENGJian—qiang4 (EmergencyDepartment，DepartmentofCardiovasology，DepartmentofHypertensionandVascularDiseases，TheFirstaf- filiatedHo~iml，DepartmentofPhysoilogy，ZhongshanMedicalCollege，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080， China．E—mail：fengq—sums@163．eom) [ABSTRACT] AIM_．Tostudywhetherexogenousneuralstemcells(NSCs)derivedfromembryonichippocampus differentiatesintotheneuronsaftertransplantedintotheinfarctperiphery ofthebraininastrokemodelnadtofurtherinvesti- gatethebehavioral improvementintherats．METHODS：TheNSCswerepreprade afterisolatedrfom theemb ryomchippo- campusofgreenfluorescentprotein(GFP)一transgenicratsandcultured．TheNSCswereidentifiedusingnestinanddou— bleeortin(DCX)asmarkers．Thecorticalin