神经调节因子对MDA—MB-231细胞mtp53和HIF-1α的影响及意义.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(5)：877—882 · 877 · [文章编号] 1000—4718(2009)05—0877—06 神经调节因子对 MDA—MB一231细胞 mtp53 和 HIF一10【的影响及意义 赵婷婷 ， 邓华瑜 ， 赵 敬 (重庆医科大学病理生理学教研室，干细胞和组织工程研究室 ，重庆400016) [摘 要] 目的：探讨在 ErbB2非过表达乳腺癌细胞 MDA—MB一231中，神经调节因子(NRGs)／ErbB2信 号通路对突变型p53(mtp53)和缺氧诱导因子 一l (HIF—let)的影响及意义。方法：免疫细胞化学法和Western blotting检测MDA—MB一231细胞中神经调节因子 (NRG)的表达。应用ErbB2受体功能抑制剂 AG825处理 MDA — MB一231细胞 ，MTr法检测细胞的增殖抑制作用；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡 ；Westernblotting检测 mtp53、HIF—let蛋白表达；RT—PCR检测HIF一1amRNA的表达。结果：神经调节因子在乳腺癌细胞 MDA—MB一 231呈显著表达，Westernblotting实验可见分子量44kD的NRG抗体阳性反应条带。应用 ErbB2受体功能抑制剂 AG825后，MDA—MB一231细胞生长受到抑制 ，作用呈时效、量效依赖关系(P0．01)；细胞周期阻滞在Go／G。期； 细胞凋亡增加(P0．05)；mtp53、HIF一1ot蛋 白表达减少(P0．05)；HIF—letmRNA表达减少 (P0．05)。结论： ErbB2非过表达乳腺癌细胞MDA—MB一231存在神经调节因子分泌，可能通过神经调节因子自分泌或旁分泌配体作 用方式使ErbB2受体信号转导处于激活状态，上调mtp53和HIF一1 的表达，促进肿瘤细胞的增殖、存活能力和抑 制凋亡。 [关键词] ErbB2通路；神经调节蛋白类；突变型p53；缺氧诱导因子 一1ot [中图分类号] R737．9；R730．231．3 [文献标识码] A Effectofneuregulinsonmtp53andHIF 一10cinMDA —MB -231cells ZHAOTing—ting，DENGHua—yu，ZHAOJing (DepartmentofPathophysiology，LaboratoryforStem CellandT~sueEngineering，ChongqingMedicalUnivemi~， Chongqing400016，China．E—mail：cqdenghy@yahoo．tom．clt) [ABSTRACT] AIM：Toexploretheeffectandsignificanceofneuregulins／ErbB2receptorsingaltransduction pathwayonmtp53andhypoxia—iduciblefactor一10【(HIF—lot)innone—overexpressionErbB2breastcancercellMDA — MB一231．METHODS：Theexpression ofneuregulin wasdetected by immunocytochemistryand Western blotting． MDA—MB一231cellsweretreatedwithErbB2 kinaseinhibitorAG825．ProliferationwasmeasuredbyMIT assay．Th e cellcyclenadapoptosisweredetermined byflow cytometry．Th eexpressionsofmtp53nad HIF一1 weredetectedby Western blotting．ThemRNA expressionofHIF一1o【was detectedbyRT—PCR．RESULTS：MDA—MB一231cel