显性负性IκBα对乳腺癌细胞株核因子κB通路和运动迁移的影响.pdfVIP

维普资讯 · l0l8· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(5)：1018—1022 【文章编号】 1000-4718(2008)05—1018—05 显性负性 IKB 对乳腺癌细胞株核因子 KB通路和运动迁移的影响 王 宏 ， 张俊平 ， 周文鹏 ， 曹厚军 ， 方 勇 ， 昊金民 (浙江省中医院肿瘤科 ，浙江大学附属邵逸夫医院，浙江 杭州 310006) 【摘 要】 目的：探讨在高转移人乳腺癌细胞中，核因子 ．cB活性对肿瘤生长及运动迁移能力的影响。方法： 转染显性负性突变的IKBa重组质粒入高转移乳腺癌细胞 MDA—MB一231、MDA—MB一435，筛选并鉴定稳定转 染的细胞株 ；凝胶迁移实验观察核因子 KB活性，细胞生长曲线 、平板集落形成试验及 Millicell—PCF培养小室观察 质粒转染对细胞生长和趋化运动的影响。结果：乳腺癌 MDA—MB一231、MDA—MB～435细胞中存在高 NF—KB 组成型激活，稳定转染显性负性的 IKBa质粒后，细胞 NF—KB活性下调，在不明显影响细胞生长 、克隆形成的情 况下，抑制高转移乳腺癌细胞株的运动能力。结论：在体外，抑制NF—KB通路 ，可明显抑制高转移乳腺癌细胞株 的运动迁移能力。 【关键词】 乳腺肿瘤 ；NF—KB；细胞转染；细胞运动 【中图分类号】 R363 [文献标识码】 A EffectofdominantnegativeI· transfectiononNF—KB pathway and cellmotilityinbreastcna cer WANGHong，ZHANG Jun—ping，ZHOU Wen—peng，CAO Hou—jan，FANG Yong2 WUJin—min2 ， (Z‘ ngProvincialHospitalofTCM 2S RunRunShawHo~tialAffdiatedtOZhej~ngUniversity，Hangzhou310006， Chn／a．E—mail：whmdzju@hotma il．com) [ABSTRACT] AIM：ToobservetheeffectonNF—KBpathwayandcellmotilityinbreastcnacercelllinesafter tramfectionofdominantnegativeIKBa plasmid．METHODS：AfterstabletrnasfcetionofmutnatIKBa plasmidintohighly metastaticbreastcnacerlines MDA—MB一231nadMDA—MB 一435，wedetectedNF—KB bindingactivitybyEMSA， cellgrowthbailitybycellgrowthcurve，colonyformingtest，nadcellmotilitybymillicell—PCF chamber．RESULTS： ConstitutiveactivitiesinMDA —MB一231nadMDA —MB一435were observed．Stabletransfectionofadominnatnegative IKBaresultde indownregulationofNF—KBbindingactivity．thusinhibitde cellmobilitywithoutsignificnateffectoncell growth．CONCLUSION：Cellmigrationabiliyt isinhibitedinhishlyinvasivebreastcnacercellsbyinhibitionofNF—KB pathwayinvitro． [KEYWORDS] Breastneoplasms；NF—