香烟对小鼠C2C12成肌细胞分化的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010 5)：88= · 881 · [文章编号] 1000—4718(2010)05—0881—04 ：l： 香烟对小 鼠C2C12成肌细胞分化 的影响 何志义 ， 梁 毅， 梁秋丽， 李梅华， 钟小宁 (广西医科大学第一附属医院呼吸内科 ，广西 南宁530021) [摘 要] 目的：探讨香烟烟雾浓缩物 (CSC)对小鼠骨骼肌 C2C12成肌细胞分化的影响。方法：小鼠骨骼肌 成肌细胞C2C12传代后分为对照组、0．3％CSC孵育组 、3％CSC孵育组，细胞在含有马血清的DMEM培养基第6— 7d可分化成熟的肌细胞。细胞分别在第 1d、第3d在相应组中加入CSC，并在第6d进行各项检测 ：通过光学显微 镜来观察细胞形态的变化 ，通过酶联免疫检测仪检测细胞内谷胱甘肽 (GSH)和肌酸磷酸激酶 (CK)的浓度，应用 Western印迹检测肌球蛋白重链 (MYHC)的蛋白表达，通过凝胶迁移率阻滞实验来检测转录因子核因子一KB(NF— KB)的活性。结果：在细胞形态上 0．3％和 3％的CSC能够抑制骨骼肌肌管的形成；0．3％和 3％CSC处理组细胞中 GSH和 CK的含量较对照组明显减少，在 0．3％和 3％的CSC孵育组中MYHC蛋 白表达明显减少，0．3％和3％的 CSC孵育组中NF—KB的活性较对照组明显增强。结论 ：CSC一方面加重细胞氧化应激，使细胞的GSH减少，同时 导致细胞的炎症反应增加，导致 NF—KB的活性增加。二者相互作用引起骨骼肌细胞的分化明显减弱。 [关键词] 肺疾病，慢性阻塞性；成肌细胞 ；香烟烟雾浓缩物 ；谷胱甘肽；NF—KB [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．05．010 Effectofcigarettesmokingcondensateonmyogenicdifferentiationofmn- rineskeletalmuscleC2C12cells HEZhi—yi，LIANGYi，LIANGQiu—li，LIMei—hua，ZHONGXiao—ning (DepartmentofRespiratory，TheFirstAffiliatedHospitalof GuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，China． E—mail：xnzhonglO1@sina．corn) [ABSTRACT] AIM ：Tostudytheeffectofcigarettesmokingcondensate(CSC)onmyogenicdifferentiationof murineskeletalmuscleC2C12cells．METHODS：MurineskeletalmuscleC2C12cells，whichhavetheabilitytodifferen— tiateintomuturemusclecells，wereculturedinhighglucose—containingDMEM complemented10％ horseserum andwere dividedintocontrolgroup．0．3％ CSCgroupand3％ CSCgroup．Thecellswereincubatedwith0．3％ or3％ CSCfor1 dayor3days．andthedetectionwasperformedon6thday．Themorphologicchangesofthecellswereobservedundermi— croscope．Intracellularconcentrationsofcreatinekinase(CK)andglutathion