糖尿病肾病证候的尿蛋白质组研究初探.pdfVIP

专题讲座 糖尿病肾病(diabetic 要死亡原因之一。在美国和在欧洲，DN已成为肾移植的第l位和第2位原因，2001年中华医学 会糖尿病分会回顾性分析表明，在我国Il型糖尿病并发肾脏疾病占35．7％，II型塘尿病患者并发 DN在逐年呈上升趋势【11．一旦发生DN出现持续蛋白尿则病情不可逆转，肾小球功能呈进行性下 降。到目前为止，尚无特别有效的方法能够防止DN的发生和发展。随着社会老龄化的加速，人们 生活水平的提高和饮食结构的改变，加之高血糖控制不理想．DN的患病率正{三l较快的速度上升．因 而对DN的深入研究有着极其重要的意义。近几年来，中医药对DN的防治显示出一定的优势， 能不同程度地改善肾脏功能、减轻临床症状口J。 一、中医对DN的认识及研究进展。 中医无DN病名，但早对DN有记载。《圣经总录云》：“消渴曰久．肾气受伤。肾主水，肾气 虚衰，气化失常，开阖不利，水液聚淤体内而成为水肿。”中医学认为DN发病机制为消渴病日久． 肾阴亏虚，肾体受损，肾阳虚衰而致。但按DN的发病机制、临床表现，可归属“虚劳”、“肾劳”、 “水肿”、“关格”等范畴讨论。众多医家在继承前人经验的基础上，结合临床体会对本病的病因 病机提出很有见地的观点，其中具有代表性的为林氏【∞提出：DN是在糖尿病气阴两虚基础上发展 而来．久病必瘀．久病必虚，久病及肾，脾肾两虚．水液输布失常，气化不利。DN的进展多由 上焦实热到下焦虚寒，由气阴两虚到阴阳两虚，最后导致浊毒内阻，即为该病的终末期，在病变过 程中，出现其证候由阴虚到阳虚的变化。另外，杨氏14J对DN中医与西医分类的分期进行了对比。 认为中医分类DN的阴虚型、气虚型、气阴两虚型。大致相当于西医分类的ⅡI期DN：阳虚、气阳 两虚为临床蛋白尿期，即持续蛋白尿期为中医分类的中期DN，大致相当于西医分类的Ⅳ期DN。 我们在分析相关文献认为：阴虚证和阳虚证在DN中最具典型性。 目前l临床上对中医药防治DN机理的研究才刚起步，而且大多数临床和实验研究还只是在现 象的观察和机理推测的水平上。中医药对DN防治的临床观察报道较多，作用机理研究较少，而 且实验研究所使用的动物模型多采用糖尿病动物模型，不利于中医药对DN机理的探讨。既往的 临床研究缺少中医证候学研究基础，主观随意性较大，箕结论普遍缺乏可信度。因此。以DN中医证 候学研究为基础，研究现代医学指标和中医辨证的相关性，建立临床DI,I中医辨证标准和疗效评定 标准，将为进行中医药防治DN的研究奠定基础。 已有从基因分子水平研究DN肾阴虚、肾阳虚证候的报导[sl，另外我们前期进行了类风湿性 关节炎寒热证候物质基础相关研究164]，表明证候确实具有其一定的基因水平的物质基础。但是， 一些研究表明，基因活性与蛋白表达水平有很好的相关性睁’“，而另一些研究结果则相反111．“。而 141 专题讲座 基因作为遗传信息的载体，均要表达为相应的蛋白质或修饰相关蛋白才能影响生物的功能。蛋白质 组正是从整体的角度，分析细胞内所有动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态，是从基因 层面向蛋白质层面的深化。因此，中医证候蛋白质组研究有着较为重要的意义。 二、DN蛋白质组学研究进展 DN的发生与其他慢性并发症一样，是多种因素综合作用所致。近年来的大量研究表明，DN的 发生是一种多基因、多因素和多系统协同作用的过程，目前对其相关基因的研究尚未达成共识所得 到的结论纷争较大，甚则结论相互矛盾，这可能与研究所采用的方法、研究对象种族差异和样本大小 有关。大家较为公认的是单基因遗传不能解释DN这一复杂疾病的发病机理．DN的发病应为多基 因的综合效应。因此，对DN发病机理研究应该改进研究的思路，借助于蛋白质组学、生物信息 学等先进的高新技术，从深层次方面去开展。 蛋白质组学在DN中的应用才开始。而尿蛋白质组学“尿蛋白质组学”(urinary proteomics) 在DN中的研究则更是刚刚起步，其作为一门在蛋白质分子认识生命机制的新兴学科是1996年 Marshal等I”】提出的概念，即：利用蛋白质组学技术高通量、系统性地分析和鉴定尿液中的所有蛋 自质分子并研究其生物学功能。研究者采用了“染料沉淀法”加双向电泳(2DE)【”】、电喷加液