神经肽三叶因子3的抗抑郁作用及其机制研究.pdfVIP

30min后进行检测，观测指标为大鼠在5min内漂浮不动时间(immobility time)。 1．2．2单次系统给予TFF3对慢性应激大鼠抑郁行为的影响 30min后，进行行为学检测。 1．2．3大鼠强迫游泳实验 第1天进行适应性游泳训练，将大鼠置于高60cm，直径25cnl的圆柱型透明容器中15min，24h之后 进行6min测试实验。摄像头进行视频记录，对后5分钟数据进行分析。观察主要指标有：“不动时间” (immobilitytime),大鼠基本上不做主动的活动，仅仅在必要的时候用后肢碰触底面或轻轻抖动以避免 窒息；“攀爬时间”(climbingtime)：大鼠比较积极主动的活动，前爪在水面上下不断运动，努力向桶 壁上攀爬的动作。 1．2．4大鼠自发活动测试 大鼠自发活动测试装置为上海吉量软件科技公司研制的白发活动系统，记录大鼠5分钟内白发活动变 化，观测指标为活动次数(crossings)。 mildstressCMS) 1．2．5慢性轻度应激(chronic 慢性轻度应激模拟了人类患抑郁症的主要原因，是目前世界上比较公认的抑郁动物造模方法。每天两 挤12h、4℃环境1h、倾斜24h、束缚1h等，连续应激2l天。 1．2．6大鼠糖水偏爱测试∞1 糖水偏爱测试分为主要包括两个阶段：1)糖水适应阶段，大鼠进行双瓶1％糖水适应24h，之后放置 单瓶纯水正常饲养；2)糖水偏爱测试，于糖水适应结束第2天，大鼠禁水但不禁食4h后，1％糖水和纯水 各一瓶称重后放置，大鼠可自由选择饮水lh，称重两个水瓶，计算lh内大鼠糖水和纯水的摄入量，测试 期间不禁食。评价指标包括：糖水偏爱值和总摄入量。糖水偏爱值=糖水摄入量／(糖水摄入量+纯水摄入 量)。 1．2．7单次TFF3给药对强迫游泳大鼠中枢c-Fos表达的影响 时用4％冷多聚甲醛灌流，按照免疫组化流程进行常规取材，进行c—Fos蛋白表达检测。 1．2．8 P13K信号通路在TFF3抗抑郁中的作用 为进一步研究杏仁核脑区介导TFF3调节抑郁行为的胞内信号通路，采用核团微注射P13K抑制剂 行为学测试。 2结果 2．1急性TFF3对大鼠强迫游泳不动时间的影响 实验结果如图l，与生理盐水对照组比较，TFF3(0．img／kg)能显著减少大鼠强迫游泳的不动时间 和DMI对大鼠自发活动没有影响(图2)。 686—— ^ m ∞ 一 ∞ ∞ 一11)．E；菪Ilo口EE— ∞ 口 】墨 05 目II，乍m＆水目№，’pO0I．’pO 100 E日O E ：80 i 40 S～ 0 月2★R 2．2单次给予TFF3对慢性应激大鼠糖水偏爱的影响 结果见图3，One—way 能显著逆转慢性应激导致的大鼠糖水偏爱下降(pO05)。