共固定化多菌种混合发酵生产稠酒地的研究.pdfVIP

第 13卷第 2期 烟 台大学学报 (自然科学与工程版) vd13№2 2000年 4月 Joumat YantaiUniversity (NaturalScienceandEngineeringEdition) Apr 2000 文章编号 ：1004-8820t2000102-0130-05 共 固定化多菌种混合发酵生产稠酒的研究 (坦 台大学 生物化学乐．山东 {目寺 264635) 摘要 ：对 以糯柬为原料，采用多菌种共 固定化细咆混台撞术耐发酵生产鹅酒进 行 1研 究 实验结果表骈，固定化多菌种发酵生产稠扭曲最佳发酵工 艺如下：多菌种 固定 化细胞接 神 配叱量为根霉 ：酿酒酵母 ：产香酵母 虹西霉 =3：12：1；圉定化凝胶粒子 充填量 为 8％；发 萎关键言词耋?：糯米；稠酒；多菌种：．固定化细细腑胞 0詹 面¨终，o 中图分 ：。’而 ——王丽 TSZ 乙 · 稠酒是 以糯米为原料酿造 的低酒度 ，富含氮基酸和维生素，风味独特的一种发酵酒 ，又 是一种高档营养保健饮品．近年来 ，由于人民生活水平 的不断改善 ，消费档次提高，高、中度 自酒销售市场下滑，而滋补型的低度发酵酒深受欢迎，尤其是稠酒倍受消费者青睐，有着广 阔的市场前景 ．我国是稻米生产大国，糯米资源丰富，大力开发稠酒有着极大的资源优势．传 统酿酒发生工艺复杂，劳动强度大．周期长，效率低 采用现代生物工程技术手段开发，生产 高品位高 附加值产 品是发酵行业生存和发展的关键所在 固定化细胞可 以进行高密度增殖培养，提高反应器单位体积的生物转化速率，延长发酵 细胞的寿命，增加稳定性，有利于实现连续化生产，有利于产物分离．混合细胞的固定化技术 的优点将传统的多菌种发酵与现代的细胞固定化技术融为一体 该项技术 已应用于食醋 、饮 料的生产[t ]．本文报道了采用共 固定化根霉、酿酒酵母 、产香酵母和红曲霉混台发酵生产 稠酒 的发酵特性 1 实验材料与方法 1．1 实验材料 根霉 (Rh．delemar3．5)、酒精酵母 (Saccharomycescereviae)、产香酵母 (S．fragrans)、 红 曲霉 (,~~Ionascuspurp“tett5)： 上菌种均 由烟 台大学生物化学系微生物教研室提供 ．优质 糯米 ：市售．海藻酸铺 ：上海化学试剂采购供应站分装厂生产 ．其他试剂均为化学纯用品 根霉斜面培养基 ：土豆汁培养基 ．酵母培养基 ：麦芽汁培养基 ．红 曲霉培养基 (质量分 数)：可溶性淀粉 3％；葡萄糖 6％；蛋 白胶 2％；琼脂 3％，pH5．5～6；121℃灭菌 30min． 发酵培养基 (质量分数)：糯米粉 20％，豆粉 2％；硫酸镁 0．025％；磷酸二氢钾 0．05％， II盘稿 日期：t999一tI一0t 基金项 目：山东省科蚤贷且打砸 日(SH9616)~华东理 太学 生物反应器国家重点宴验室资且打课题 作者简介 ：王克明ct949 )．男．辽宁大连人，尉教授，硕士 主要从事植物发酵工程方面的岍究． 蒂2期 王克明，等：共固定化多菌种混合发酵生产稠酒 的研究 pH4．5． 1．2 实验方法 1．2．1 共 固定化细胞 的制备 分别接种根霉和红 曲霉孢子 2环于 2只装有 30mL2％米 粉培养基 ，30℃振荡培养 42h；2种酵母分别在完全培养基 ，30℃培养 12h，然后将 4种活 化培养的菌液分别于 5000r／min离心 15min，得到孢子、菌体浓缩液，以无菌水稀释孢子菌 体浓缩液 ，并调整菌数达到 1O～1O 个／L，将 4种菌 的菌悬液按 一定 比例混台后与海藻酸 钠溶液混合 (凝胶终浓度为 2．5％)，搅拌均匀后滴入 5％CaCI中，制得直径 4mm 的球形 粒子，用无菌水洗涤 2次后 ，置 4℃备用． 1．2．2 固定化细胞的增殖培养 把共固定化细胞粒子 2OmL加入装有 100mI含 2％米粉 的增殖培 养基 中，140r／min，30℃振 荡培养 48h． 1．2．3 固定化细胞用于发酵 于 200mL发酵培养基 中加入 2OmL共 固定化细胞粒子 ，置 入 1000mL三角瓶 中2O～25℃静止发酵 ． 1．2．4 分析检测方法 l4‘ ①总糖含量 的测定 ：斐林试液法 ；②总酸含量 的测定 ：酸碱滴定