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维普资讯
微生物学通报
JUL20，2008，35(7)：1016 1020
M icrobiology
@ 2008byInstituteofM icrobiology
． CAS
tongbao@im． ac．cn
米根霉菌 ldhL基因的克隆及其在 抛
大肠杆菌中的表达
郭怡皤 迟玉杰 王君伟
(1．东北农业大学食品学院 哈尔滨 l500301
f2．东北农业大学动物医学院 哈尔滨 150030)
抛
_一
摘 要：以米根霉菌基因组 DNA 为模板， 根据 GenBank上 已公布的米根霉 L一乳酸脱氢酶基因
(， ，J)序列设计特异性引物，PCR扩增得到 963bp的DNA片段， 经序列分析后将其亚克隆到原核 ．小
表达载体pET30a上，构建成重组质粒 pET30a—IdhL
。 将pET30a—ldhL转化到BL21感受态细菌中
，
经IPTG诱导表达后进行SDS—PAGE分析
， 可见约43kD的与预期大小一致的目的蛋白条带
． 结果
表明ldhL基 因在大肠杆菌中进行 了表达， 经酶活分析产物的酶活力为 98U／mL
， 证明了表达产物
具有预期的酶活性，这为进一步研究利用乳清为发酵原料高产 L一 乳酸的米根霉基 因工程菌株奠定
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