吉西他滨耐药的A549与NCIH460细胞中耐药相关基因的表达与RRMl37AC基因多态性.pdfVIP

生望艘擅苤查垫!Q生!旦箜丝鲞筮!翅垦塾垫』Q!型：丝!坠!翌丝!Q：!生：丝：旦!：．! ·17· ．基础研究． 吉西他滨耐药的A549和NCI—H460细胞中 耐药相关基因的表达和RRMl(一)37A／C 基因多态性 刘晓晴王伟霞林莉 宋三泰 【摘要】 目的研究吉西他滨(Gem)耐药的A549和NCI-H460细胞中胞啶脱酰氨酶(CDA)、 核糖核苷酸还原酶Ml亚单位(RRMl)、lOq丢失的与张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)、切除修 复交叉互补基因1(ERCCl)和脱氧胞苷酸酶(dCK)的表达以及RRMl(-)37A／C基因多态性。方法 采用药物临床血浆峰浓度冲击与逐步增加剂量相结合的诱导方法，成功诱导抗Gem的细胞系A549／Gem 和NCI-Hd60／Gem。在药物诱导前、诱导过程中和诱导成功后，采用实时荧光定量PCR法检测其 A549／Gem和NCI-H460／Gem细胞在药物诱导过程中，耐药指数(RI)随诱导时间的延长分别升至 163．228和181．684，但达到一定峰值后逐渐降低，直至产生稳定的耐药性，R1分别为115．297和 129．783。RRMl、PTEN、ERCCI和CDA mRNA表达量随着对Gem耐受程度的变化增高和降低，而 dCK mRNA表达变化不明显。RRMl(．)37等位基因野生型引物能扩增出诱导各阶段A549／Gem和 前的基因型与其亲代细胞一样，仍均为野生型。结论与亲代细胞比较，A549／Gem和NCI．H460／Gem细 胞的CDA、RRMI、PTEN和ERCCl表达升高，dCK表达变化不明显；RRMl(-)37位点单核苷酸元突 变，其基因型与亲代细胞一样为野生型。 【主题词】癌，非小细胞肺；细胞系；吉西他滨；基因表达；多态性，单核苷酸 ofGemcitabine．resistance-relatedand ofribonucleotidereductaseM1 Expression gene polymorphism in cell Gemcitabine．resistantA549／GemandNCI-H460／GemfinesUU genepromoter X洳．qing． Cancer Center WANG耽i·xia，L，ⅣLi，SONG PLA，7‰ San一组i．DepartmentofLung ofOncologyof 307 Medical A历liatedHospitalat‰AcademyofMilitary Sciences，Be讲ng，D|∞71，China a眦hor：L，U CorrespondingXiao—qing，Email：Liuxq@medmail．com．cn To the of Objeetive deaminase(CDA)，ribonueleotide 【Abstract】 assayexpressioneytidine reductasesubunit andteasin deletedfromchromosome homologue 10(PrrEN)， l(RRMI)，phosphatase excision lepairclxyss-complementationgroupl(ERCCI)，deoxycytidinekinase(dCK)andRRMl(-)37A／C