MC培养基在乳酸菌菌落计数中应用.docVIP

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MC培养基在乳酸菌菌落计数中的应用   MC培养基用途:   用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数(GB/T 4789.35-2010)。   原 理:   大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解,以辨别乳酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH指示剂。   培养基配方(每升): 5g 牛肉膏粉 3g 酵母膏粉 3g 葡萄糖 20g 乳糖 20g 碳酸钙 10g 琼脂 15g 中性红 0.05g   最终pH6.0±0.2   使用方法:   1、称取培养基76g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15-20min。   2、无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL),放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内,振摇均匀,即为1:10稀释液,依次做1:100、1:1000……稀释。   3、将MC培养基凉至50℃左右,注入平皿中约15mL(本品含有碳酸钙,摇匀后方可倾注平板),待琼脂凝固。   4、选择2-3个合适的稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,吸取0.1mL稀释液于平皿上,用L型棒涂布,每个稀释度做2个平皿。翻转平板置于36±1℃兼性厌氧培养48h。   5、选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数,并乘以相应的稀释倍数,以10的指数表示进行报告。

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