华支睾吸虫分子分类与其28kuGsTs原核表达研究.pdfVIP

以及在宿主血液内的消除半衰期的差异有关。结论：三苯双脒、甲苯咪唑、阿苯达唑、青蒿琥酯和 吡喹酮均为有效的抗华支睾吸虫药物。联合用药可达减量、增效双重效果，50mg／kg三苯双脒分别 与50mg／kg甲苯咪唑或阿苯达唑配伍用药对治疗大鼠华支睾吸虫疗效较好。这些化合物联用有望成 为替代吡喹酮单剂治疗的安全、高效的用药方案。 华支睾吸虫分子分类及其28kuGSTs原核表达的研究 唐颖1，路义鑫1，韩彩霞1，张子群2，李晓云1，宋铭忻1 《1．东北农业大学动物医学学院．哈尔滨150030； 2．黑龙江出入境检验检疫局．哈尔滨150080) 摘要t华支睾吸虫病是由于华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)寄生于人、猫、犬等动物的肝脏和胆 囊内而引起的一种人兽共患寄生虫病。近年来，华支睾吸虫的研究主要集中在其形态特征的描述、 生活史的研究及华支睾吸虫病的流行病学调查、诊断、药物防治和预防措施等方面，关于其分子分 类和重组抗原的研究少见报道。核糖体DNA(rDNA)是细胞核内编码核糖体RNA的基因，由内部 线粒体DNA(mONA)为母系遗传，其基因间很少重组，所以可以反映出母系的进化历史，这样线 粒体一个基因就可以代表整个线粒体基因组的变异情况。因此，本实验以华支睾吸虫核糖体内转录 氢酶亚基3(NAD3)基因为研究对象，对目的片段进行克隆和序列测定，构建分子系统发生树，来 探讨华支睾吸虫在后睾科中的系统发生位置。谷胱甘肽S转移酶(GSTs)是广泛存在于各种生物体 内的一组抗氧化反应同工酶，通过催化内源性和外源性毒素与谷胱甘肽的结合，从而解除毒性复合 物的毒性，对寄生虫在宿主体内存活发挥着重要作用。同时，GSTs具有较强的免疫原性，可用于免 疫诊断或作为候选疫苗分子用于免疫预防。 本研究以采自宾县、大庆、海伦、双城、泰来、同江和长春7个地区的华支睾吸虫为研究对象， 和NAD3基因的多态性，并与GenBank登录的麝猫后睾吸虫、猫后睾属吸虫、东方次睾吸虫、广西 株、沈阳株、韩国株和美国株华支睾吸虫等进行比对分析。使用Phylip3．66软件采用邻接法(NJ) 绘制系统发生树。序列分析结果表明，华支睾吸虫核糖体ITSl、COX2和NAD3编码基因大小分别 为661bp，636bp和357 类地位处于后睾科内，同时证明各地区存在差异。以上结果显示：ITSl、COX2和NAD3基因均可 作为遗传标记用以鉴定华支睾吸虫在后睾科的位置，科内属间的遗传关系，还可以用来区分属下种 间的遗传关系。 287 blot)分析和 表达产物经十二烷基磺酸钠．聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS．PAGE)、蛋白质印迹(Western 鉴定。本研究结果显示人源华支睾吸虫GSTs编码区含有639个碱基，编码212个氨基酸残基；表 达的蛋白存在于上清中，大小约为42．68ku，可被感染华支睾吸虫人的阳性血清识别，证明GSTs基 因可在原核表达系统中高效表达并具有反应原性。 基金项目：十一五国家科技支撑计划项目(2010BAD04801．2)；国家质检总局科技计划项目 通讯作者：宋铭忻，e-mail：songmx@neau．edu．g：U 肝片吸虫囊蚴感染小鼠后AAMO中脂肪滴 及其相关蛋白的定位与分布 罗洪林”王豪举1谌剑波1周容琼2周作勇2张文韬1郭智莉1周雪梅1 (1．西南大学动物科技学院预防兽医学重庆市重点建设实验室．重庆北碚400716；2．西南 大学荣昌校区动物医学系．重庆荣s402460) 摘要：目的阐明肝片吸虫感染小鼠后选择性巨噬细胞(AAMO)中脂肪滴及其相关蛋白的定 位与分布，为后续研究AAMO的功能奠定基础。方法以肝片吸虫囊蚴为感染源，经口分别感 细胞，并设立人工巯基醋酸盐诱导巨噬细胞对照组进行体外培养。用荧光定量PCR检测AAMO 的标记蛋白RelIll专和Yml以确定其激活状态。采用特异性抗体对所获取的巨噬细胞细胞质染 色后用共聚焦显微镜摄取不同时间点从不同小鼠体内获取的巨噬细胞染色后的图片，并记录其荧光 强度。结果Relm岭和Yml基因在