马尾藻多糖对鸡法氏囊淋巴细胞体外增殖影响.pdfVIP

中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 马尾藻多糖对鸡法氏囊淋巴细胞体外增殖的影响 张玲1，胡庭俊11，潘贵珍1，谢丽丽1，何颖2，陈忠伟2，刘伟2 (1．广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005；2．广西壮族自治区兽医研究所) BursaDisease 鸡传染性法氏囊病毒(Infectious 链RNA组成，是世界上引起鸡的重要疾病的病毒之一【M1。该病毒能够引起青年鸡的急性、免疫抑制性 疾病【3】，感染并破坏法氏囊免疫球蛋白B淋巴细胞引起肉眼可见和微观的损害‘舢6】。可致淋巴细胞裂解川。 免疫抑制导致鸡对细菌和病毒的易感性增加，降低了对疫苗的免疫应型剐和抗氧化力【91，给养禽业造成 严重的损失。 近年来，中药多糖作为一种高效低毒的新型免疫增强剂及抗病毒药物，不仅推动中医药学理论和临 床相结合，而且对促进动物健康有极大的作用。据研究，马尾藻的重要成分之一——马尾藻多糖 (Sargassum 活性且无毒副作用[10-14】。由于淋巴细胞增殖和分化间接调节机体免疫功能，是机体免疫应答过程的重要 阶段【l51。因此，本试验以鸡法氏囊淋巴细胞为研究对象，旨在探讨SP对鸡免疫细胞增殖的影响，为多 糖作为新型免疫增强剂提供科学依据。 1．材料与方法 I．I材料 1．1．1动物和病毒 1日龄健康鸡，购自广西大学实习牧场，饲养至3周龄。 1．1．2试剂 RPMI Medium1 RPMIMedium1 1 640(GIBCO，11 Corporation)； 55， 835，Invitrogen 640(GIBCO，2 minimumessentialmedium lnvitrogenCorporation，不含酚红)：Eagle’s 116](InvitrogenCorporation)胎 剂有限公司。 1．2方弦 1．2．1马尾藻多糖对鸡法氏囊淋巴细胞增殖的影响 1．2．1．1鸡法氏囊淋巴细胞培养 严格按照动物福利规范，无菌取3周龄灵山土鸡法氏囊，制备淋巴细胞悬液[17．18】。细胞沉淀用含 mmol／L U／mL 有10％热灭活胎牛血清(FCS)的RPMI一1640(2L一谷氨酰胺，25 2．巯基乙醇，100 I_tmol／L 青霉素和100 cells／mL，放入温度38．5 ttg／mL链霉素)重悬细胞，台盼蓝计数，调整细胞浓度为2．00x106 12，5％C02的二氧化碳培养箱培养。 1．2．1．2鸡法氏囊淋巴细胞增殖的检测 9】，法氏囊淋巴细胞增殖和活力检测方法如下：调整细胞浓度为2．0x106 参考文献报道【1 cells／mL， LPS对照组(只加LPS)、多糖各剂量组(终浓度为50“g／mL，100烬,／mL、200ire／mE或400“g／mL)、 1基金项目：国家自然科学基金项目资助；广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻0992014-6)； 通讯作者：胡庭俊(1965一)，男，汉族，甘肃兰州人，博士，教授，从事免疫药理方面的教学与研究． 304 中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 多糖各剂量组(终浓度为50肛g／mL，100pg／mL、200Hg／mL或400pg／mL)+ConA／LPS组(终浓度为 10 h时，加入20皿MT