人工自然血吸虫感染性钉螺对小鼠感染性研究.pdfVIP

第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 人工与自然血吸虫感染性钉螺对小鼠的感染性研究 3 喻鑫玲 ，周杰，胡君健，何永康，李岳生 （湖南省血吸虫病防治所, 岳阳 414000 ） 【摘要】目的 探讨室内人工培育与野外自然感染性钉螺对小鼠的感染性差异。方法 将 240 只昆明种小鼠随机分为 4 组，以常规法室内人工与野外自然血吸虫感染性钉螺逸蚴， 并以 40 条尾蚴感染小鼠，以平均虫负荷、成虫发育率、肝脏虫卵和粪便虫卵为指标进行观 察。结果 自然感染性钉螺感染小鼠的虫荷、发育率、肝卵EPG 及粪卵 EPG 均明显高于人 工组（P 均 0.05 ）。结论 人工与自然血吸虫感染性钉螺对小鼠的感染性有明显差异。 【关键词】钉螺; 血吸虫尾蚴; 感染性 湖北钉螺 Oncomelania hupensis 是日本血吸虫 Schistosoma japonicum 生活史中唯一的 中间宿主。钉螺生物学的研究、控制钉螺的研究、血吸虫病流行病学调查研究、血吸虫疫苗 的研究以及教学等，均需要各种特定的钉螺。过去主要是依靠人工野外采集而获得，随着血 吸虫病防治工作的不断深入，采集钉螺日益困难，因而需要进行钉螺的人工繁殖与饲养实验 室保种传代。同时，目前对野外自然感染性钉螺和室内人工感染性钉螺逸出的尾蚴对宿主感 染性是否存在差异有研究空白。因此，对其血吸虫成虫负荷、成虫发育率、肝脏虫卵负荷和 粪便排卵量等指标进行观察，探讨室内人工与室外自然血吸虫感染性钉螺对小鼠的感染性差 异，为血吸虫疫苗评估现场试验及血吸虫病防治药物药效评估的完善与标准化提供科学依 据。 1 材料与方法 1.1 感染性钉螺 1.1.1 人工感染性钉螺 采集东洞庭湖区钉螺，经试管逸蚴法获得血吸虫非感染性钉螺，取当地血吸虫病阳性水 牛粪便，集卵孵化毛蚴；按毛蚴与钉螺 30:1 比例感染，于25 ℃培养。每周喂食一次，直至 逸出尾蚴，以试管逸蚴法获得感染性钉螺，共计 60 只。 1.1.2 自然感染性钉螺 采集东洞庭湖区钉螺，经试管逸蚴法获得感染性钉螺，共计 60 只。 [基金项目] 湖南省卫生厅科研基金项目（132008-058），湖南省血吸虫病免疫与传播控制重点实验室。 [作者简介] 喻鑫玲（1966-），男，硕士，副主任技师，主要从事血吸虫病科研防治工作。 xinlingy66@126.com 。 398 第十一届中南地区实验动物科技交流会论文集 1.2 动物及处理 清洁级 10 周龄昆明小鼠，120 只，体重 21±3g ，雌雄各半，购自上海斯莱克实验动物有 限责任公司[SCXK （沪）2007-0005] 。随机分为4 组：人工雌性组、人工雄性组、自然雌性 组、自然雄性组，每组 30 只。用上述两种感染性钉螺各 60 只，在相同条件下同时逸出血吸 虫尾蚴，分别感染 4 组小鼠，每鼠感染尾蚴 40 条，饲养 8 周后解剖。 1.3 观察指标 1.3.1 血吸虫发育率 用撕碎法收集各只鼠体内成虫，并计数，计算各组平均虫荷及成虫发育率，发育率 每 鼠成虫数/感染尾蚴数×100%。 1.3.2 肝卵 EPG 取每只鼠全部肝脏组织，称重，剪碎，37℃ 5 ％KOH 消化处理后，计数虫 卵，计算每克肝组织虫卵数。 1.3.3 粪卵 EPG 在解剖前 1 天将小鼠单只分笼饲养，收集 24 h 粪便，称重，计数虫卵，计 算每克粪便虫卵数。 1.4 统计分析 用 SPSS13.0 统计分析软件对小鼠平均成虫数、肝卵 EPG 、粪卵EPG 进行分析。 2 结果 2.1 人工感染性钉螺与自然感染性钉螺对小鼠感染性比较 人工感染性钉螺与自然感染性钉螺分别感染小鼠后，虫荷、发育率、肝卵 EPG 及粪卵 EPG 均有显著性差异（P 均 0.05 ），4 指标均自然组明显高于人工组（表 1）。 表 1 人工培育阳性螺与野外感染阳性螺感染小鼠结果 指标 组别 鼠数 M±SD 95%CI t 值 P 值 （N ） 虫荷 人工 30 23.93±4.93 22.09, 25.77 3.09 0.003 自然 30 27.43±3.78 26.02, 28.84 发育率 人工 30 59.83±12.32 55.23, 64.43 3.09 0.003 % 自然 30 68.53±9.44 65.06, 72.11 肝卵 人工 30 5803.69±1560.49 5221.00, 6386.39 11.06 0.000 EPG 自然 30 19800.97±6752.59 17279.51, 22322.42 粪卵 人工 30 107.73±10.32 10