日本血吸虫感染不同易感性宿主比较研究.pdfVIP

日本血吸虫感染不同易感性宿主比较研究.pdf

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吸虫、蛔虫、弓形虫、旋毛虫病血清抗体,无交叉反应。与T-DIGFA法阳性符合率为100%,阴性符 合率为100%;血吸虫抗原胶体金在4~8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。重组蛋白金标 免疫渗滤法具有抗原容易制备和良好的敏感性、特异性、重复性和稳定性,适合于基层单位和现场进 行家畜血吸虫病抗体的快速诊断。 日本血吸虫23kDa膜蛋白 Sj23 与 人免疫球蛋白的相互作用分析 姜宁1,武闯1,陈启军1’2 1.入兽共患病教育部重点实验室吉林大学人兽共患病研究所长春130062; 2.中国医学科学院病原生物学研究所寄生虫学研究室t00730 的膜表面均有表达,直接暴露于宿主的免疫系统,是宿主对虫体免疫应答的首要靶标,也是目前公 BALB/c小鼠,发现其激发产生以IgG2a为主的非细胞嗜性抗体,但特异性抗体应答与免疫保护无关。 进一步研究发现日本血吸虫利用Sj23与宿主 包括人 的抗体结合,进而逃避宿主的免疫清除作用。 IgM、白蛋白的粘附作用。结果发现Sj23仅与人IgG具有较强的亲和力,与猪IgG有弱地亲和力。 这表明Sjc23对宿主的免疫调节作用具有宿主差异性,血吸虫对动物机体的适应程度可能要弱于人 类。进一步研究发现,Si23蛋白质与人非特异性IgG结合的位点在IgG的Fc片段。 的粘附。Sjc23.LED的三级结构预测显示,这9个氨基酸位于第二个螺旋区域,其后端保守而前端 的差异标志着其可能具有和其他TSP家族成员不同的生物功能。 这些结果说明日本血吸虫利用Sjc23与宿主的免疫系统相互作用,在诱导低亲和力抗体的同时, 将吸附宿主非特异性IgG抗体从而逃避宿主免疫反应。Sj23抗原是一个参与免疫逃避的调节抗原。 日本血吸虫感染不同易感性宿主的比较研究 林矫矫、洪炀、彭金彪、蒋韦斌、傅志强、石耀军、 N.Gobert,李祥瑞 刘金明、冯新港、韩红晓、Geoffrey Institute 中屋农科院上海兽医研究所;QueenslandofMedical Australia;南京农业大学 摘要:寄生虫感染的建立和维持及寄生虫和宿主相互作用关系一直是寄生虫学研究的热点和前沿。 本研究以日本血吸虫易感动物BALB/e小鼠、非易感动物Wistar大鼠和对血吸虫具有天然抗病作用 的东方田鼠作为动物模型,作了一些初步的探讨。应用日本血吸虫感染三种不同易感宿主,观察比 较寄生虫形态学和宿主组织病理学差异。应用基因芯片技术、蛋白质组学技术、分子与细胞生物学 技术及生物学信息学等比较分析了日本血吸虫感染三种不同宿主后10天童虫基因和蛋白表达差异, 和宿主肺、肝组织基因表达差异,分析发现了一批可能与血吸虫存活、生长发育相关的虫源性分子, 及可能影响血吸虫存活、生长发育的宿主源性分子。同时对一些关键分子进行了生物学功能及作用 和调控机制等研究,评估了关键分子作为血吸虫病疫苗候选分子的应用潜力,为阐明日本血吸虫的 生长发育机制,探索血吸虫与宿主的相互作用关系积累了有价值的信息。 1、日本血吸虫感染三种不同宿主后寄生虫形态和宿主肺、肝组织病理变化差异 1 不同宿主来源日本血吸虫10d童虫形态差异比较 以日本血吸虫尾蚴感染小鼠、大鼠和东方田鼠,10d后收集虫体。光镜下观察到不同来源日本 镜下观察,东方田鼠来源童虫虫体萎缩,口吸盘形成空泡,表面结构消失,腹吸盘表面结构改变, 体表正常棘消失,萎缩,形成空泡;小鼠和大鼠来源虫体体表棘等结构无异常变化。透射电镜观察 发现,东方田鼠来源童虫虫体细胞结构受到破坏,细胞崩解,细胞核仁消失,染色质凝集。小鼠和 大鼠来源虫体细胞形态正常,细胞核和线粒体无明显变化。 2 小鼠、大鼠和东方田鼠感染日本血吸虫后肺、肝等组织病理学变化观察 对感染日本血吸虫的东方田鼠、大鼠和小鼠的肺、肝进行组织病理学观察,结果显示:感染日 本血吸虫尾蚴10天后,与小鼠和大鼠相比,东方田鼠体内出现更强烈的免疫应答和病理损害,肝中 具有特征性的虫源性肉芽肿,由炎性细胞包围童虫而形成。’HE染色显示免疫效应细胞以嗜酸性粒细 胞为主,中性粒细胞和巨噬细胞等为辅,提示上述先天免疫细胞介导的效应在东方田鼠抗日本血吸 虫感染中发挥了重要作用。 √ 流式细胞术检测表明血吸虫感染大鼠CD4+细胞含量和CD 4+/CD8+比值均明显升高,CD8+细胞 应答可能影响了宿主对血吸虫感染的敏感性。 3 不同宿主来源日本血吸虫10d童虫体细胞凋亡分析比较 应用TUNEL和Annexin iodide PI 分析不同宿主来源10天童虫体细胞凋亡状 V-FITC/propidium 况以及caspase活性水平,结果小鼠来源虫体的凋亡细胞比例为0.40%;大鼠来源虫体的凋亡细胞比 例为5.22%;东方田鼠来源虫体的凋亡细胞比例

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