肉苁蓉水提液与其主要成分对大鼠成骨细胞OPN+mRNA表达影响.pdfVIP

中国畜牧兽医学会中兽医学分会2011年学术年会论文集 ～定影响…，对于临床替代副作用大的治疗骨质疏松的药物奠定了理论基础。IGF—I能刺激成骨细 胞的DNA和RNA的合成，促进细胞的生长、增殖及分化，它以自分泌和旁分泌的形式调节骨骼细胞的 功能，影响骨的形成，并抑制小鼠成骨细胞的凋亡，如增加骨胶原的形成、增加有功能的成骨细胞 的数目等【51。本研究中可以得出肉苁蓉水体液与其单一成分 麦角甾苷和松果菊苷 和雌二醇比较， 对成骨细胞IGF—ImRNA的促进作用具有显著性差异。当机体发生骨质疏松时，肉苁蓉水提液可以有 效地提高成骨细胞IGF-ImRNA的表达，影响骨形成，增加骨量和骨密度，从而防治骨质疏松。 参考文献： 7-5364—3096—5 [1]于船． 中兽医学大辞典》．成都，四川I科学技术出版社，2002 5 ，ISBN effectsof a1．The on [2]S．Bord，D．C．Ireland，S．R．Beavart,etestrogen 4 inhumun 36—11 estrogen osteoblasts[J]．ElsevierScience，2003：1 receptorexpression [3]吴培福，钟代彬，曲伟杰，等．小鼠成骨细胞改良酶的消化分离培养[J]．甘肃农业大学报，2004，39 5 ：512-515 [4]赖满香．骨质疏松症的中药治疗机制探讨[J]．中国现代药物应用，2010，4 3 ：235—237 14 ：1791—1794 [6]程志安，吴艳峰，李红毅，等．健骨二仙对成骨细胞IGF—ImRNA表达的影响[J3．中国中西医结合杂 志[J]．2003 23 ：170—173 [7]Birnbaum inIGF-I andsecretion RS，BowsherRR,WirenKM，eta1．Changes andⅡexpression the anddifferentiationofnormalrat duringproliferation osteoblasts[J]．JEndocri，1995，14 4 ：251 mRNA表达的影响 肉苁蓉水提液及其主要成分对大鼠成骨细胞OPN 李彩虹’，刘钟杰“，郑世军，韩博，王九峰， 中国农业大学动物医学院，北京100193 肉苁蓉又称大芸、金笋、苁蓉、地精，始载于汉代《神农本草经》，为列当科植物肉苁蓉 Cistanche sala G．Beck。 的肉质茎，具有补肾阳、益精血、滑肠通便等功能。常用于治疗阳痿、腰肢寒痛、肠燥 便秘等症¨吨1．《医经精义》指出：“肾藏精，精生髓，髓养骨，故骨者，肾之合也，髓者，精之所生也， 精足则髓足，髓在骨内，髓足则骨强。”肾精亏虚，骨髓的生长之源不足，不能濡养骨骼，便会出现骨 质失养，引发骨质疏松症13’。雌激素是目前治疗骨质疏松常用药物之一H1。本试验采用实时荧光定量的 方法测定不同浓度肉苁蓉水提液及主要活性成分麦角甾苷和松果菊苷，作用不同时间后对体外培养大鼠 成骨细胞OPNmRNA表达的影响。并以雌二醇 2．8X 10喝mg／mL 为阳性对照怕1，用以探讨肉苁蓉在防 治骨质疏松症等骨科疾病方面的机理，为临床用药提供理论基础。 1．材料与方法 。作者简介l李彩虹 1984- ，硕士研究生，主要从事中兽医学研究，．rainbow 009@163．eom． ¨通讯作者l刘钟杰，教授，E-mail：liuzhon面iecau@163．com． 229 中国畜牧兽医学会中兽医学分会2011年学术年会论文集 1．1实验动物新生24h内的SD大鼠乳鼠 北京兴隆试验动物场 。 1．2药物及试剂 肉苁蓉饮片 北京同仁堂北药店康大家园店 ；麦角甾苷、松果菊苷和雌二醇 中国药品生物制品 和标准胎牛血清 Solarbio ；玎型胶原酶 Sigma ；TransZol、pEASY—T3CloningKit和TrandScript First—StrandcDNA SynthesiS Green 天根生物科技有限公司 ；其余试剂均为国产分析纯。 旋转蒸发仪 北京亚荣生化仪器厂 ：ADpliedBiosystems7500实时定量PCR仪 AppliedBiosystems 。 1．4药液的制备与分组 rain，煮沸后再用文火煎煮25min， 肉苁蓉饮片509，与蒸馏水按1：10 W：V 的比例混合，浸泡30 滤出药液，药渣再加10倍蒸馏水再次煎煮25min，过滤，合并两次滤液，滤液旋转蒸发浓缩成浓度为 10—2， 0．59／mL的生药液，调pH至7．2—7．4，过滤除菌，4℃密封保存，用前过滤用DMEM培养基稀释 5X 5×10—3，5×10-4mg／mL 。称取麦角