一株降解N-酰基高丝氨酸内酯酵母菌菌株的分离鉴定及其降解特性.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # % ’ % 年 月 日 #$$ ! ! !#$ %’ * +$ ,-$ ! *+,- #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 一株降解 酰基高丝氨酸内酯酵母菌菌株的分离鉴定及其降解特性 ! 邱 健，贾振华，马 宏，张 霞，宋水山 （河北省生物研究所 石家庄 $$$/） 摘 要：利用 酰基高丝氨酸内酯（ ，简称 ）为唯一碳源和能源，筛选得到一株能够降解 D D37@E-39 6 82+,;2 -7@ ;2 FG 的菌株 。常规鉴定和 序列分析表明，菌株 属于红冬孢酵母菌（ ），定名为 FG H/ / I +JD H/ !#$#%#’ $ * +#’ ,# $-% 。结果显示 能利用所测试的 种 作为唯一碳源和能源生长，具有降解 的 ! ? +#’ ,# $-% H/ ! ? +#’ ,# $-% H/ % FG FG 能力，其对 依赖型胡萝 卜欧文氏软腐病菌（ ）的致病有一定的抑制作用。 FG .’/ 0 1 21’#+#3#’1 8:K8* ? 21’#+#3#’1 关键词：群体感应； 酰基高丝氨酸内酯； ；酵母菌；系统发育 D3 / I +JD 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） L4%4 $$$/3.#$4 #$$ $#3$%3$! 近些年的研究发现，单个细菌之间存在着信息交流，并 （ ）和 （ ）均购自 0.3FIG D3 @ 7; E-3JG39 6 82+,;2 -7@ ;2 0 3FIG 且通过这种不同个体甚至不同种群间的信息交流对外界环 公司； 用 酶、 、 、 连接酶购 I,M67 P0H ;1 QD1P8 13R2@ + 1!JD 境变化进行群体性应答。这种细菌与细菌之间的信息交流 自 公司； 纯化试剂盒和 凝胶回收试剂盒购 P+ 62M7 P0H JD ［］ / 称为群体感应（ ，简称 ） 。群体感应在协调 L: +:6 82;8,;M LI 自时代天根公司。 细菌群体基因同步表达和细菌生物学功能上起着非常重要 菌种和质粒：大肠杆菌（ ） 、 （含 #$ #$% .%2-’ 2 1 2#, JF! /$ 的作用。具有群体感应的细菌不仅能够向环境中分泌一种 有 1 5 信号分子水解酶基因）均由实验室保存，根癌农杆菌 特殊的、可以扩散的化学小分子化学物质（也称为信号分 （ ） （ ），群体感应的报告菌 56’#712+-’ * + *-8 12 -0% D1G! *SGH! 子），而且还可以检测环境中的信号分子，并且以细胞密度依 株，含有+’1 T ,12? 融合基因，以及+’1! 基因，庆大霉素抗性， 赖型的方式对信号分子的积累进行应答。当环境中的信号 用量为%$ MU6G，本身不产生 FG8，外源 FG8 可诱导,12? 基 分子达到一定的浓度阈值时，它与细菌内的特异受体蛋白结 因大量表达，水解V3M7-，产生明显的颜色变化（由法国W7:OO8 ［ ］ # ’ ! 合，诱导一系列靶基因的表达，调控相关的生物学功能 。 教授惠赠）。欧文氏胡萝 卜软腐病菌（ .’/ 0 1 21’#+#3#’1 酰基高丝氨酸内酯（ ， ）作为革 D3 D37@E-39 6 82+,;2 -7@ ;2 FG 8:K8* ? 21’#+#3#’1 ）由中国农业科学院植保所赵延昌博士惠赠 兰氏阴性细菌的主要信号分子，是调控群体感应的关键因 培养基： 无碳源无机培养基： ， ， #$ #$ # D70- /M X0- $ YM 子，降解 FG 能扰乱和阻断群体感应，阻断病原菌的发病机 · ， ， · ， ZM0- .F [ $ Y!M DF 0- $ Y%M 070- #F [ $ Y /M XF P[ # # ! # # # ! 制，提高植物的抗病性。目前国外已报道的含群体感应猝灭 ， ， （ ） $ Y#M D7 I[ $ Y /M #3 D36 +*9 -,; 32 97;28:-\ ;,@ 7@,Q # ! 酶的菌种已有 多种，其中包括 个芽孢杆菌（ /$ ! 412 ,, % （ ） ，蒸馏水定容至 ， ， ， 灭菌。 麦 Z5I /M /G *F Y /#/] #$6,; $ ）、根癌农杆菌（ ）、节杆菌 8*2@,28 56’#712+-’ * + *-8 12 -0% 氏培养基（用于酵母菌培养）：葡萄糖 ， ，酵母浸膏 /M X0- /Y M （ ）、肺炎克雷伯氏菌（ ）、铜 5’+’