痹痛合剂对骨性关节炎大鼠软骨细胞Bcl-2及关节液IL-1和TNF-a表达的影响.pdfVIP

实 验 研 究 痹痛合剂对骨性关节炎大鼠软骨细胞 Bcl一2及 关节液 IL一1和TNF一0(表达的影响 朱桂松 杭柏亚 (南京市中医院，江苏南京210001) 摘 要 目的：观察痹痛合剂对骨性关节炎(OA)模型大 鼠软骨细胞 B细胞淋 巴瘤 ／白血病一2(Bcl一2)mRNA及 关节液 中 白细胞介素一1(TI一1)和肿瘤坏死 因子一0【(TNF—d)表达 的影 响 。方法 ：48只 SD大 鼠随机分为空 白对 照 组 、模 型组和治疗组各 16只，模 型组与治疗纽大 鼠用切 断双后肢 内侧副韧带及膝前 内侧筋膜扩张部 的方法复制 OA模 型 ，空 白对照组和模 型组常规饲养 ，治疗组术后 即加服痹痛合剂 (每 日3次 ，每次 5mL) 术后第 8周处死 ， RT—PCR法检测大 鼠软骨细胞 Bcl一2mRNA表达 ，ELISA法检测大 鼠关节液 中IL一1和 TNF— 的蛋 白质水平 、结 果：模型组与治疗组大 鼠软骨细胞 Bcl一2mRNA表达 ，关节液 中IL一1和 TNF— 蛋 白表达均 明显高于空白对照组 ， 治疗组 Bcl一2mRNA表达 明显高于模型组 。IL一1和 TNF一0【蛋 白表达 明显低于模型组 ．．结论 ：痹痛合剂能显著促进 关节软骨细胞 Bcl一2mRNA 的表达 ，并抑制炎症 因子 IL一1和 TNF— 的表达 ，具有一定 的减轻或延缓骨性关节炎 的作 用 、 关键词 痹痛合荆 骨性关节炎 B细胞淋巴瘤／白血病一2 白细胞介素一l 肿瘤坏死 因子一仅 实验研 究 中图分类号 R241．1 文献标识码 A 文章编 号 1672—397X(2013)09—0072—03 骨性关节炎 (osteoarthritis，OA)义称退行性关节病 ，是指 1-2 买验 方 法 关竹的症状和体征与关节软骨的完整性受损 、软骨下骨板及 1．2．1 动物模型的建立 参考 Hulth法造模 【l：取 SD雄性大 炎节边缘 的骨病变有关的一组异质性疾病l】1，以修复不 良和 鼠，体重 200～220g，用硫 喷妥钠从耳静脉麻醉后 ，固定 ，常规 关节结构破坏为主要病理特点 。目前认为 ，细胞凋亡学说是 备皮消毒 ，沿髌骨韧带 内侧缘切 口，切断双后肢 内侧副韧带 本病主要发病机制之一 ，而软骨细胞 的B细胞淋巴瘤／白血 及膝前 内侧筋膜扩张部，并在断端处修剪去除约 2mm，造成 病一2(Bcl一2)基 冈表达 与细胞凋亡的调控密切相关㈦。Bcl一2 双后肢膝外翻畸形 ，逐层缝合伤 口，无菌敷料及绷带包扎 固 基因是细胞凋亡蛋 白家族成员之一 ．参与细胞凋亡 的调控 ． 定 ， 在程序性细胞凋亡 中起十分重要的抑制作用2[1。近来研究表 1．2．2 分组与给药 SD大 鼠48只随机分为空 白对照组 、模 明，炎症 闲子如 白细胞介素一1(IL一1)和肿瘤坏死 因子一 型组和治疗组 ，每组 16只，模型组和治疗组造 OA模型 ，空白 (TNF一 )在骨性关节炎发生发展 的病理生理过程 中也起着 对照组与模型组常规饲养 ．治疗组术后即加用痹痛台剂灌 胃 重要 的作川 ，介导关节软骨的破坏I--。痹痛合剂是我 院院内 (每 日3次 ，每次 5mL)，连续 8周 。 制刺 ，存 临床上广泛用于骨性关节炎的治疗 ，并取得了 良好 1．2_3 半 定量 RT—PCR检测软 骨细胞 中Bcl一2mRNA表 达 的疗效 。本实验通过建立 OA大 鼠模型 ，探讨痹痛合剂对大 停止给药后 ，处死大 鼠，取材部位消毒 ，切卜大鼠股骨内踝 鼠软骨细胞 Bcl一2及关节液 IL一1和 TNF—d表达的干预作用 软骨连 同胫骨平 台关节面 ，PBS洗净 ，10％EDTA (含 1／1000 及其机制 DEPC)脱钙 10d，3％柠檬酸新鲜稀释 的 胃蛋 白酶 37℃消化 1 材料与方 法