补肾生血解毒方对再生障碍性贫血小鼠白细胞生成的影响.pdfVIP

：纾 垂㈣ 誊 鬈 誊 霉 鬻 。 补肾生血解毒方对再生障碍性贫血小鼠 白细胞生成的影响 董 玢 张 弛 刘 涓 r 柴立民 (1．北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部和北京市重点实验室，北京 100700； 2．北京 中医药大学，北京 100029) 摘 要 目的：探讨补 肾生血解毒方对理化 因素致骨髓抑制造成再生障碍性贫血 (AA)模型小鼠白细胞生成的影响。 方法 ：BALB／C小鼠随机分为空 白组、模型组和补 肾生血解毒方小、中、大剂量组，除空白组 以外其余各组小鼠以 Co一 射 线复合环磷酰胺致小鼠骨髓造血抑制 ，补 肾生血解毒方小、中、大剂量组分别给予不 同剂量 中药灌 胃，其余 2组予等量 生理盐水灌 胃 血细胞计数仪检测小鼠外周血中白细胞(WBC)的改变，酶联免疫吸附测定 (ELISA)检测外周血血清中 粒细胞一巨噬细胞集落刺激 因子 (GM—CSF)含量 的差异，real—timePCR检测骨髓细胞 中GM—CSF受体 O．／、B基 因表达 的改变。结果：与模型组 比较 ．补 肾生血解毒方可 以明显提高AA模型小鼠外周血 白细胞数量(小剂量作用 14d)，显著 增加外周血血清中GM—CSF含量和骨髓细胞 中GM—CSF受体基 因的表达 。结论 ：补 肾生血解毒方治疗 AA发挥疗效 作用 ，可能与提高GM—CSF活性和诱导造血细胞分化为成熟的白细胞 ，并促进其增殖、发挥免疫调节作用有关 。 关键词 再生障碍性贫血 补 肾生血解毒方 白细胞 粒细胞一巨噬细胞 骨髓细胞 实验研究 中图分类号 R556．505 文献标识码 A 文章编号 1672—397X(2014)01—0077—03 再生障碍性贫血 (aplasticanermia，AA)是由于化学、物理、 空 白组、模型组和补 。肾生血解毒方小、中、大剂量组，每组 10 生物因素及不明原因引起的骨髓造血功能衰竭 ，红骨髓总容量 只。除空 白组以外，其余各组小鼠一次全身2．5Gy6OCo一-／射 减少．代以脂肪髓，骨髓中无恶性肿瘤浸润，以全血细胞减少为 线照射 (剂量率 1．1053Gy／min，距离 240em，时间 135s)，空 白 主要表现的一组综合征 ．临床上常表现为较为严重的贫血、出血 组小鼠假照射 (铅砖屏蔽)。分别于照射后第 4、5、6天腹腔注 和感染l1]。我们以当归补血汤和龟鹿二仙胶化裁创立补肾生血解 射环磷酰胺 40mg／kg2[]，空 白组小 鼠注射等容量生理盐水 。造 毒方，用于临床治疗急慢性AA，取得了良好的治疗效果 。为进一 模结束后第 1天开始药物干预 ，补肾生血解毒方小、中、大剂 步研究补肾生血解毒方治疗 AA的作用机制 ，我们以理化因素 量组按成人剂量的5、10、20倍计算 。分别灌 胃给予补 肾生血 致骨髓抑制造成 AA小鼠模型，予补肾生血解毒方干预 ，观察该 解毒方6．14、12．29、24．57g／(kg·d)，模型组和空 白组分别给予 方对AA小鼠外周血 白细胞 (Whitebloodcell，WBC)生成 的影 等量 的生理盐水 ，连续灌 胃 13d。 响，以及血清中粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子 (granulocyte— 2．2 外周血 WBC数量检测 分别于造模结束后 0、7、14d， macrophagecolonystimulatingfactor．GM_CSF)含量 和 GM— 小鼠尾静脉取血 ，血细胞计数仪检测外周血中WBC数量。 CSF受体(GM-CSFreceptor，GM—CSF1R)、B基因表达的影响。 2-3 外周血血清及骨髓细胞样品制备 药物干预结束后 ，小 l 实验材料 鼠摘眼球取血 ，室温放置 1h后 ，2500r／min离心 15rain，分离 1．1 实验