穿山龙总皂苷对大鼠滑膜细胞株VEGF 与 AP-1的影响.pdfVIP

医药导报2015年 3月第34卷第 3期 ·285· · 药物研究 · 穿山龙总皂苷对大鼠滑膜细胞株 VEGF与 AP一1的影响木 高亚贤 ，王永为 ，郭亚春 ，宋鸿儒 ，肖丽君 ，安高 ，梁秀军 ，翟泽玲 ，段一娜 (承德医学院1．免疫学教研室；2．人体解剖学教研室；3．病原生物学教研室；4．预防医学教研室，承德 067000) 摘 要 目的 观察含穿山龙总皂苷血清对大鼠滑膜细胞株RSC一364血管内皮细胞生长因子 (VEGF)mRNA和激 活蛋白．1(AP一1)活性的影响，探讨其抑制血管新生的作用机制。方法 制备含穿山龙总皂苷和雷公藤 (阳性对照)血 清。将培养好的大鼠滑膜细胞株RSC一364分为空白对照组、模型对照组、含雷公藤 多苷血清组和含 穿山龙总皂苷血清 组，培养 1h，除空白对照组外，其余各组加入 IL一17和TNF一0(【均为 10 g·L )共同孵育24h。采用实时荧光定量PCR 方法检测各组细胞VEGFmRNA表达，凝胶 电泳迁移率实验法(EMSA)检测各组细胞核蛋白提取物AP一1的DNA结合活 性。结果 与空白对照组比较，模型对照组VEGFmRNA表达水平及AP一1DNA结合活性显著增高(P0．05，P0．01)； 与模型对照组比较，含雷公藤 多苷血清组、含穿山龙总皂苷血清组 VEGFmRNA表达水平及AP一1DNA结合活性均降低 (P0．05)，且两组间比较，差异无统计学意义。结论 含穿山龙总皂苷血清可以抑制VEGFmRNA表达水平及AP一1 DNA结合活性 ，其机制可能是通过抑制转录因子AP一1来调控血管新生关键因子VEGF产生，进而抑制血管新生。 关键词 穿山龙总皂苷；关节炎，类风湿；血管新生；RSC一346 ；血管内皮生长因子；激活蛋 白一1 中图分类号 R286；R965 文献标识码 A 文章编号 1004—0781(2015)03—0285—05 EffectsofTotalSaponinsfrom RhizomaDioscreaeNipponicaeonVEGFandAP-1inRat SynovialCellStrain GAOYaxian，WANGYongwei，GUOYachun，SONGHongru，XIAOLijun，AN Gao，LIANGXiujun， ZHAIZeling，DUANYina(1．DepartmentofImmunology；2．DepartmentofHumanAnatomy；3．Departmentof PathogenBiology；4．DepartmentofPhylaxiology，ChengdeMedicalCollege，Chengde067000，China) ABSTRACT Objective TostudytheeffectsofmedicatedserumwithtotalsaponinsfromRh／zomaDioscreaeNipponicae (RDN)onVEGFmRNAexpressionandAP一1activityinratsynovialcellstrainRSC一364inducedbyIL一17nadrINF—ft．．Toinvestigate themechanism abouttotal saponinfrom RDN inhibitionofangiogenesis． M ethods MedicatedselMm oftotalsaponinsrfom RDNand tfipte~ um (positivecontro1)wereprepared．RatsynovialcellsRSC一364weredividedintofourgroups：theblnakcontrol，IL一17+TNF- 仅model，tfipte~ ummedicatedseDlm，andtotalsaponinsmedicatedserumgroups．Afteronehourofincubation，allgroupsexceptfor theblank