SIRT1%2fPGC-1α对醛固酮诱导肾小球足细胞损伤保护作用其机制与研究.pdfVIP

因子(TFAM)的表达应用实时定量PCR和Westernblot方法检测；SIRTl对PGC．1Ⅱ的调 控作用应用荧光素酶报告基因技术及免疫共沉淀检测。 结果：1、醛固酮呈剂量和时间依赖方式诱导肾小管上皮细胞发生线粒体功能障碍，表现为 活性氧生成增加、线粒体膜电位下降、ATP合成减少、mtDNA拷贝数减少及线粒体呼吸链 酶复合体I、ⅡI、Ⅳ酶活性下降。2、醛固酮呈时间依赖方式抑制肾小管上皮细胞内PGC．10t、 TFAM的表达。3、PGC．1Q表达抑制后，HK．2细胞发生线粒体功能障碍，同时亦发生EMT， 达抑制诱导的HK2细胞线粒体功能障碍亦可引起EMT的发生。5、PGC—la过表达可抑制 胞线粒体功能障碍及EMT，该作用可被PGC—lasiRNA所阻断。7、SIRTl激动剂白藜芦醇 制剂烟酰胺(nicotinamide)所阻断。 的可能机制之一，sI】盯1伊GC—la轴对EMT的抑制作用可能是通过保护线粒体功能实现的。 SIRTl／PGC．1Q对醛固酮诱导的肾小球足细胞损伤的 保护作用及其机制研究 袁杨冈0掌黄松明木券朱春华牛丁桂霞宰陈荣华群张爱华宰孝 (牛南京医科大学附属南京儿童医院肾脏科；撑南京医科大学儿科研究所南京210029) 目的：观察线粒体功能障碍在醛固酮诱导的。肾小球足细胞损伤中的作用，探讨过氧化物酶体 增殖子活化受体7共激活因子一lo【(PGC—la)及其上游调控分子沉默信息调节因子SIRTl对 醛固酮(Aldosterone)诱导的肾小球足细胞损伤的保护作用及其机制。 方法：体外培养小鼠肾小球足细胞，采用荧光探针DCHFDA染料检测细胞内活性氧生成情 况；电镜检测足细胞内线粒体形态的改变；荧光素酶法检测细胞内ATP含量；JC一1染色流 式细胞仪检测线粒体膜电位；实时定量PCR检测mtDNA拷贝数：应用实时定量PCR和 Western 胞仪检测细胞凋亡情况；应用caspase3、8、9的底物分别检测三者的活性。体内实验通过 皮下埋置含有醛固酮的渗透性微泵建立醛固酮肾损伤模型，检测线粒体功能及足细胞损伤相 关指标。 结果：1、醛固酮呈剂量和时间依赖方式诱导足细胞发生线粒体功能障碍，表现为活性氧生 成增加、线粒体膜电位下降、ATP合成减少、mtDNA拷贝数减少及线粒体形态改变。醛固 酮呈剂量和时间依赖方式诱导足细胞损伤，表现为足细胞凋亡增加、caspase3、9活化以及 伤发生的时间。2、醛固酮呈剂量和时间依赖方式抑制足细胞内PGC—la的表达。3、PGC—la 表达抑制后，足细胞发生线粒体功能障碍及损伤。4、PGC．1a过表达可抑制醛固酮诱导的足 细胞线粒体功能障碍及损伤。5、SIRTl可在转录水平调节PGC．1a的表达，在转录后水平 调节PGC—la的乙酰化程度。SIRTl过表达抑制醛固酮诱导的足细胞线粒体功能障碍及损伤， 该作用可被PGC．1a 断。7、体内实验白藜芦醇可减少醛固酮灌注小鼠模型蛋白尿的生成，抑制醛固酮灌注所诱 导肾小球线粒体功能障碍以及足细胞损伤的发生。 结论：醛固酮可诱导肾小球足细胞损伤，其可能机制与线粒体功能障碍有关；SIRTl／PGC．1a 轴可能通过改善线粒体功能从而抑制醛固酮诱导的肾小球足细胞损伤。 转化生长因子II型受体是双向性调节肾脏炎症和纤维化的关键分子 孟晓明黄晓茹肖军陈海勇钟翔钟志刚蓝辉耀 (香港中文大学内科及药物治疗学系；李嘉诚健康科学研究所香港) 参与TGF．B信号通路的启动，而且决定TGF-Igl在肾脏损伤中的作用。 II型受体，通过结 方法：本研究利用Cre／LoxP系统靶向敲除小鼠肾小管上皮细胞的TGF．B II型受体对肾脏炎症和纤维化的影响。 SLd,鼠单侧输尿管建立梗阻性肾病模型，观察TGF-Ig 体外研究利用病毒介导的Cre重组酶敲除原代肾脏纤维母细胞的TGF．DII型受体，以及利用 II型受体功能，用细胞因子 显性抑制突变技术干扰肾小管上皮细胞株(NRK52E)TGF．B TGF．131处理细胞后进一步验tITIgRII在病理状态下的功能。 结果：1)靶向敲除肾小管上皮细胞TBRII明显抑致了单侧