纤维蛋白平板法测定纳豆激酶方法的改进.pdfVIP

分析与检测 中 国 酿 造 2008年第7期 总第 184期 ·77 · 纤维蛋白平板法测定纳豆激酶方法的改进 杨 明 ，董 超 ，史延茂 ，张丽萍 ，李 楠 (1．河北工业大学化工学院，天津 300100；2．河北省生物研究所，河北 石家庄 050081) 摘 要：对利用琼脂糖．纤维蛋白平板法测定纳豆激酶活力的方法进行了改进，对测定纳豆激酶活力的标准 曲线的规律进行了研究。 研究发现，当尿激酶活力在2Oo1，mI～．lo0o0I，mI肘，尿激酶活力的常用对数lgu与对应的溶圈面积S呈线性相关，其表达式的斜率与 孵育时间、孵育温度和平板厚度有关。通过试验确定了测定纳豆激酶活力的最佳孵育时间为15h，此时的酶活测定标准 曲线为： lgU=O、0052S+b，b值的确定方法为：将2种标准尿激酶液的酶活力和对应的溶圈面积分别带入标准 曲线lgU=0．0052S+bq~，分别求出 其对应的修正系数bl,b：，以b= 为标准 曲~lgU=0．o052s+b的修正系数，利用此法计算酶活力的相对误差为o．22％。 关 键 词：纳豆激酶；酶活力；琼脂糖．纤维蛋白平板法 中图分类号：0656 文献标识码：A 文章编号：0254—5071(2008)07—0077—04 Improvementonthemehtodofmeasuringhteactivityofnattokinasewiht agarose—fibrinplate YANGMing一，DONGChao，SHIYanmao ，ZhangLiping，LINan2 f1．CollegeofChemistryandChemicalEngineering,HebeiUniversityofTechnology, Tinajni300100,Chnia；2．HebeilnsdtuteofBioloyg,Shijiazhuango5oo8LChina) Abstract-．ThemethodofmeasuringhteactivityofnattokinasewiⅡ1agarose-fibrinplatewasimproved．ThestandardcurvewhichwasusedtOmeasure hteactivityofnattokinasewasstu~ed．Therelationshipofhtecommonlogarithm ofhteurokinaseactivityandhtedissolvingcirclesubmittedhte regressionship whilehteurokinase activityrangeis2OOU／m1～lOOOOU／m1．Theslope ofhteequation isrelated tO hteincubation time，hte incubationtemperaturenadhteplateheightThebestnicubationtmieofmeasuringhtenattokinaseactivityis15h，nadhtestandardcurveis：lgU= 0．0052S+b．ThevalueofbCna becalculatedasfollows：puthteactwityvalueanddissolvingcricleoftwoknidsofurokniasesintohteequation L lL lgU=0．o052s+b，htenbInadb2wereworkedout，nadhtevalueofb= 三 ．Ther