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中药粉末显微鉴别技术.pdf
中药粉末显微鉴别技术
第一 取样、制片、染色
节
一、取样
取样的代表性直接影响到结果的判断准确,因此必须重视取样的各个环节。
(一) 对照品
对照品粉末是检定供试品的参照物,其制备是显微鉴别的先决条件。有经验
者,可自取标本,鉴定后制作,或购买药材经品种基原鉴定。还应注意有些
药材的显微特征受生长年限及环境的影响,会产生一定的波动,所以对于供
试品的产地、采收期、加工方法等也应当认真记录。
(二) 供试品
中药材 原药材应注意基原、产地、规格的完整性、清洁程度以及有无水迹、霉
变或其他物质污染等情况,并详细记录。
(1)从同批药材包件中抽取有代表性的检定用样品。
(2)对破碎的、粉末状的或大小在 1cm 以下的药材,一般药材 100g-500g;粉
末状药材25g;贵重药材5g-10g;个体大的药材,根据实际情况抽取代表性的样
品。
(3)将所取有代表性样品混合均匀,即为总样品量。
(4)前处理:将供试品捡净后,用量较小时,可以用乳体或小型电磨粉碎过《中
国药典》6号筛(1.0μm-250μm)备用。
1、中成药
(1)取样:从各批号的箱、包、瓶中随机取样,记录好厂家、批号,从各
包装盒中任意取1丸,每批号不得少于3次。各供试品留样保存,保存期限至少
1年。
水丸无包衣时,可直接取 2 丸-3 丸,乳钵中研成细粉后,取少量置裁玻片
上,滴加规定的试液,搅拌均匀,使粘结的细胞、组织分离,再按粉末特征加水
合氯醛试液或其他适当试液处理后观察。
水蜜丸或大蜜丸;可直接用刀片横向切开取一薄片,或用小钢铲取一小块(约
15mg)放置在载玻片上制片观察。
(1) 去包衣:中药片剂常见包衣为糖衣,隔离层常使用胶浆、糖浆和滑石
1
粉。水丸和糊丸等(挂)衣的材料有滑石、蔗糖、朱砂、雄黄、青黛、百草霜、
礞石、赫石等。可用刀片将包衣剥去,简单的办法也可将片剂或丸剂断为两半,
直接取内心,粉碎进行观察。
(2) 添加剂:为便于观察,可对中成药的制造过程中使用的添加剂做适当
的前处理。
除去水溶性干扰物:将检品置于蒸馏水中研匀,离心处理,取沉淀物检查。
除去脂溶性干扰物:将检品滴加适量氯仿,离心处理,取沉淀挥干氯仿后检查。
除去淀粉,糊化淀粉的干扰:将检品滴加蒸馏水研匀,置烧杯中煮沸、冷却,离
心处理,取沉淀检查。
以上操作中,为防止某些显微特征的流失,应进行留样观察。
二、制片
(一)制片
1、载玻片与盖玻片 载玻片与盖玻片是影响图像质量的因素之一。因载物
台下的聚光器是按使用一定厚度的载玻片设计的。首先应选择规格统一的载玻片
(厚0.9mm-1.2mm)与盖玻片(厚0.12mm-0.17mm)。使用前,将载玻片与盖玻片
用无水乙醇浸泡后,用柔软的绸布或无纤维人造纸揩擦,至表面洁净无暇。
2、制片 将供显微观察的粉末药材或样品置于载玻片上,然后加入适宜的
试液1滴,用玻璃棒搅匀,用镊子将盖玻片沿一侧轻轻放下,使液体自然展匀即
可。可用滤纸吸拭溢出的液体或从盖玻片边缘补充液体不足的空隙。
(二)制片按使用试剂分类
1、稀碘液制片 主要用于观察含淀粉粒。
2、斯氏试液制片 试液由醋酸:甘油:水(1:1:1)组成。用于观察
包括淀粉粒在内的所有显微鉴别特征。
3、水合氯醛制片 水合氯醛试液能渗透组织,使皱缩的细胞膨胀并能溶
解淀粉粒、蛋白质、树脂、挥发油和叶绿素等,使细胞组织变得透明而清晰。
4、乙醇装片 在观察的切片中有菊糖、粘液、树胶等时,使用95%以上
的乙醇。
(三) 制片按保存时间分类
1、临时制片 封藏介质一般为流动性液体,不耐久藏。但制作简易、适
2
用于一般的显微观察及显微化学反应。
2、半永久性制片 在上述临时制片周围,直接使用加拿大树胶,将盖玻
片周围封严,室温放置 1 天干燥后,
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