巴戟天糖链对缺氧复氧损伤内皮细胞的血管形成作用研究.pdfVIP

中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2011Feb；27(2)：281—4 ·281· 巴戟天糖链对缺氧复氧损伤内皮细胞的血管形成作用研究 王 宁 ，周 鹏 ，冯国清 ，刘心玉 ，张培君 ，吴 斌 ，胡香杰 ，乔 鹏 (1．郑州大学基础 医学院药理学教研室，河南 郑kl1450052；2．河南中医学院一附院，河南郑州 450001) 中国图书分类 号：R284．1；R322．123；R329．24；R542．2； 细胞迁移及管腔样结构形成的影响，旨在进一步观 R845．22 察MOO促血管生成效应，并为其在缺血心肌保护 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2011)02—0281—04 及促进缺血心脏建立侧枝循环方面的作用提供更加 摘要 ：目的 探讨巴戟天糖链 (MOO)对缺氧复氧损伤内皮 直观的实验依据。 细胞的促血管形成作用。方法 建立人脐静脉内皮细胞 1 材料与方法 (HUVEC)缺氧复氧损伤 (H／R)模型，实验分为 6组 ：正常 1．1 实验材料 细胞组、H／R模 型组、H／R+阳性对照组、I-I／R+MOO大、 1．1．1 实验细胞 人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 中、小剂量组 。用倒置显微镜观察细胞形态；流式细胞仪测 量在 H／R条件下的细胞周期 ；采用 transwell小室迁移实验 郑州大学生物系多肽生化实验室祁元明老师惠赠。 和小管形成实验检测 MOO对体外内皮细胞血管形成的作 1．1．2 主要药品及试剂 巴戟天糖链 (Mofindaof- 用。结果 ①与正常组相 比，H／R模型组增加 了G +S期 ficinalisoligosaccharides)的制备：巴戟天 (购 自广东 的细胞 (P0．05)，与模型组相比，MOO大、中剂量减弱了这 省德庆县药材公司，一等品，河南省药品检验所李杰 种趋势(P0．05)，使细胞状态更接近于正常细胞；②MOO 鉴定)生药 15kg粉碎后，分次用体积分数为0．70 各剂量组细胞迁移数量高于模型对照组 (P0．05)；③MOO 的乙醇在90％水浴中煮60min，将乙醇提取液旋蒸 各剂量组小管形成的面积较模型对照组亦增多(P0．05)。 回收乙醇，得浓缩液。用适量的蒸馏水稀释后 ，分别 结论 MOO可以减轻H／R对血管内皮细胞的损伤 ，抑制细 用乙醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，弃去乙醚、乙酸 胞凋亡，有效促进H／R损伤的内皮细胞迁移和形成血管。 乙酯、正丁醇可溶部分，得到醇提物的水溶部分，用 层析柱方法分离收集糖链部分，其纯度为98．76％。 关键词 ：巴戟天糖链；内皮细胞；缺氧复氧损伤 ；流式细胞检 实验用蒸馏水稀释配成9．0、3．0、1．0g·L 3种浓 测；细胞迁移；小管形成 度药液备用；麝香保心丸，上海和黄药业有限公司， 巴戟天(radixmorindaofficinalis，RMO)为茜草 取 1g加入无血清RPMI1640中研磨制成20ml混 科植物，肉质根人药，是我国著名的四大南药之一， 悬液，1500r·min 离心去沉淀，再用0．22 m微 孔滤膜过滤，4℃保存；Matrigel，BD公司；RPMI1640 具有传统的补肾壮阳、强筋骨，祛风湿等作用。巴戟 培养基，美国Gibco公司产品；胎牛血清，杭州四季 天糖链 (morindaeofficin