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《现代免疫学》2009 年第 29 卷第 6 期 4·91 · 抗 CD20 人源化抗体的制备及生物学活性鉴定 1 1 ,2 1 1 ,2 2 1 ,2 1 ,2 1 ,2 杨扬 , 张大鹏 , 吴兰 , 郭怀祖 , 聂丽 , 钱卫珠 , 王皓 , 李博华 ( 1. 第二军医大学肿瘤研究所 , 上海 　200433 ; 2 . 抗体药物国家工程研究中心 , 上海 　20 1203) 摘要 : 在前期实验中 , 我们制备了一株抗 CD20 的嵌合抗体 c8F6 并证实其可有效杀伤 CD20 阳性的B 淋巴瘤细胞 。为了进 一步降低 c8F6 的免疫原性 , 在研究中我们采用同源模建的方法模拟 8F6 的三维结构 , 通过分析其空间结构 , 确定可能影 ( ) ( ) 响抗体与抗原结合的框架区 FR 氨基酸残基 , 然后将鼠源抗体互补决定区 CDR 和 FR 区的关键氨基酸移植到人源模板 上 , 构建出人源化抗体 hu8F6 。此人源化抗体除 CDR 区外 , 仅含有 11 个鼠源残基 , 但具有与嵌合抗体相似的亲和力和特 ( ) 异性 。体外生物学功能实验进一步表明 , hu8F6 具有与 c8F6 相似的补体依赖的细胞溶解作用 CDC 和抗体依赖细胞介导的 ( ) 细胞毒作用 ADCC , 可有效杀伤人 B 淋巴瘤细胞 Raj i 和 Daudi , 提示 hu8F6 有望发展成为一个用于 B 淋巴瘤治疗的低免 疫原性抗体制剂 。 关键词 : 人源化 ; 免疫原性 ; 同源模建 ; 单克隆抗体 ; 8F6 中图分类号 : R392 . 11 文献标识码 : A 文章编号 : 100 12478 (2009) 06049 106 ( 　　非霍奇金淋巴瘤 Non Ho dgkin ’s lymp ho ma , 在人体 内的应用 。在研 究 中, 为 了进一步 降低 N HL ) 是临床上最常见的淋巴系统恶性肿瘤 , 其中 c8F6 抗体的免疫原性 , 我们将鼠源抗体的 CD R 移 B 细胞来源的约 占 85 % 。近年来 , 单克隆抗体及 植到人源抗体模板中 , 通过计算机辅助设计成功构 其导向治疗 N HL 的临床试验研究取得了重大进 ( ) 建了高亲和力的 8F6 人源化抗体 hu8F6 并鉴定了 展 , 其中被广泛使用且富有成效的是抗 CD20 的单 它的体外抗肿瘤活性 。 抗制剂[ 1 ] 。CD20 抗原是一种 B 细胞分化抗原 , 仅 1 　材料与方法 位于前 B 细胞和成熟 B 细胞 , 它在 95 % 以上的B 细胞性淋巴瘤中表达