拉伸麦管实现玻璃化保存的热特性分析.pdfVIP

中国工程热物理学会 传热传质学 2002年学术会议 编号：023130 拉伸麦管实现玻璃化保存的热特性分析 周国燕‘华泽钊。 匡延平2 3 。上海理工大学制冷与低温研究所上海200092上海市第一妇耍保健医院生殖中心上海200040 摘要：本文研究了普通麦管和拉伸麦管在玻璃化保存过程中的降温速率和复温速率．结合溶液差示|1 描置热曲线进行分析．研究表明采用拉仲麦管可将降温速率由普通麦管的2500--4700K／min提南 某些溶液解冻时的反玻璃化问题更需要重祝．拉仲麦管的复温速率高于降温速牢，有利于防止反 玻璃化产生。 关键词：玻璃化，拉仲麦管，速率，反玻璃化，差示扫描量热 冷冻方法低温保存人类胚胎获得妊娠成功111以来，人类胚胎保存技术不断完善，已经成 为IVF3-作中不可或缺的重要组成部分¨J。但是传统的慢速冷冻方法操作复杂、耗时长， 而且它已发展得十分成熟，很难进一步提高临床妊娠率。在这种情况F．玻璃化冷冻方 法越来越引起人们的关注。玻璃化是液体在降温过程中由丁二粘性增人而同化为玻璃态的 过程。1985年，Rall和Fatty玻璃化保存老鼠胚胎获得成功。是玻璃化保存技术走向实 用化的突破p】。1997年以后陆续出现人类胚胎玻璃化保存妊娠成功的报道。但剑目前为 lh还没有任何一种成熟的方法应用于临床。在这个背景F，上海理l：人学的制冷与低温 研究所与上海市第一妇婴保健医院生殖中心合作研究一种能够应Hj丁临床的玻璃化保 存人类胚胎的方法。 使溶液玻璃化有两条途径．一条是极大地提高冷却速率；另一条是增加溶液浓度。 一般情况下降温速率加快，溶液浓度可以降低。 早期的胚胎玻璃化保存使用麦管(straw)14J。使用高浓度保护剂溶液，麦管直接插 入液氮实现玻璃化，解冻时将麦管从液氮中取山快速投入复温水域来防It反玻璃化出 现。这种方法要求溶液的浓度较高，毒性较人。近年来从提高降温速率雨I复温速率角度 Pulled 出发，分别发展了多种方法。如拉伸麦管(Open 17l、显微镜片(electron slab)191和超低温液氮㈣的方 microscop／：grid)ISl、金属片(metaI 法。 拉伸麦管是将外径1．95ram、管壁厚0．25ram的麦管加热后拉伸得到，使麦管外径 变细到约O．27—O．4mm，管壁变薄到约O．05ram。玻璃化操作时利刚拉伸麦现象将待冻 存的胚胎吸进管内。采用拉伸麦管可以直接将装有玻璃化溶液和胚胎的拉伸麦管插入液 氮，解冻时可以直接快速从液氮中取出投入解冻液中。这种方法实现胚胎的玻璃化保存， 不会出现低温断裂现象．解冻存活率比较高(实验室数据待发表)。 14J研究 以往配制低毒高效玻璃化溶液的研究主要通过大量的实验来完成，如J．Ali 胚胎保存保护剂时．在玻璃化形成能力研究中实验了lO种常见的保护剂，从中选择了6 种进行了毒性研究。不同保护剂、不同浓度组合共进行了几千次实验，]：作量非常火。 另外一个途径以理论指导研究。测得某种特定玻璃化方法能够达到的摄人降温速率和复 997 温速率．具有形成玻璃化能力的最低玻璃化溶液浓度可以计算出来。然后在此基础上进 行实验，实验次数会减少。这方面研究很少。 本文研究了拉伸麦管玻璃化方法相对于普通麦管玻璃化方法在降温速率和复温速 率方面的对比情况，结合所用玻璃化溶液的差示扫描量热(DSC)曲线，分析该种方法 的玻璃化特性。为胚胎玻璃化保存技术改进研究提供数据。 2．实验方法．测试系统：主要包括PCL．818HG可编程高增益数据采集} FRANCE)。 玻璃化溶液：借鉴J．Ali【4】研制的VSl4玻璃化溶液，将HWM培养液换成HTF培 EG+I．0M 养液，即玻璃化溶液：5．5M