不同剂量环磷酰胺对小鼠免疫功能抑制作用的研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会中兽医分会2011年学术年会论文集 氨酶、谷丙转氨酶、尿素、肌酐的含量；颈椎脱臼处死，取脾脏、胸腺，称重，计算免疫器官指数(rag／g)。 1．4小鼠脾淋巴细胞转化试验 颈椎脱臼法处死小鼠，取脾脏，置含5mLPBS液的灭菌平皿中，在200目不锈钢网上研磨并过筛， min，弃上清。加入lO倍体积Tris-NH4CL，混匀， 制成单细胞悬液。收集细胞悬液于1500rpm离心8 室温放置5min～10min，1500 rpm离心10 96孑L甲底培养板中，每孔0．1 110 MTT液，10 lal。孔，于培养板各孔内加入lmg／mL 孔，摇匀后，10min内用酶标测定仪测OD550nm值。 1．5白细胞计数 取0．02mL，加入3％乙酸溶液0．38mL稀释血液，用小滴管自摇匀的稀释液中吸取少量液体加入 血绀fff曼计数池内，静置l～2分钟，在显微镜下用低倍镜计数4个大方格的白细胞总数，然后将该数乘 以50，即得每立方毫米的白细胞数。 1．6数据处理与统计学分析 差异显著；P0．01为差异极显著。 2结果 2．1不同剂量环磷酰