糖尿病肾病瘀血阻络大鼠模型的确立及其验证.pdfVIP

基础研究 糖尿病肾病瘀血阻络大鼠模型的确立及验证 陈志强徐晶白璐马二卫 河北省中医院 【摘要】目的：制备并验证糖尿病肾病瘀血阻络大鼠模型，观察化瘀通络中药的干预作用。方法高糖高脂饲料联合腹腔注射 肾脏病理和血脂、血流变的改变情况。同时观察化瘀通络中药干预同样方法造模的z组大鼠16周，对以上指标的改善情况。结 果：M组大鼠于腹腔注射S眩后3天，血糖升高，并逐渐出现多饮、多食、多尿、体重减轻及大量蛋白尿的表现；肾脏病理改变为 肾小球体积增大，基底膜增厚，系膜增生，肾小囊腔缩小；血脂、全血粘度、血浆粘度和肾体重比值显著高于C组、H组(P<0．01)， 腔注射的糖尿病肾病模型，成功模拟了人类糖尿病肾病瘀血阻络的病变特点，化瘀通络中药干预显著改善了模型大鼠的肾损伤 程度及相关血液指标，通过以效测证的方法佐证了瘀血阻络证候的存在。 【关键词】糖尿病肾病；瘀血阻络；模型；化瘀通络 糖尿病肾病(diabeticnephropathy，DN)是世界范围内糖高脂饲料喂养，4周后，所有动物禁食不禁水12小时，M组 renal l讧e 终末期肾病(ends诹e dise鹳e，EsRD)及进行肾替代治和z组大鼠予腹腔注射l％srIZ(Enz0science)40mg／kg 疗的最主要原因之一[1五]，给人类健康生活带来巨大负担。中 体重，将其溶于O。lM的枸橼酸缓冲液(PH4．3)中，72小时后 医药在临床延缓和阻止其进展方面的潜力已初见端倪，其辨 尾静脉取血，检测血糖≥16．7咖ovL为糖尿病大鼠造模成功， 病辨证治疗是基于中医对疾病及证候本质的认识，故证候研 血糖未达标者予剔除；c、H组给予等体积不含sTz的O．1M 究显得尤为重要。糖尿病并发的肾损害，是因糖尿病日久不愈 枸橼酸缓冲液(PH4．3)腹腔注射。糖尿病大鼠造模成功后，各 引起瘀血内阻，深入于络所致，属于中医学“络病”范畴，其主 组继续相应饲料喂养16周。期间，Z组大鼠按照大鼠与人的 要的病机是久病人络，瘀血阻于肾络，即病位在肾在络，现已 体表面积计算大鼠的饮片日给药剂量为混合颗粒剂1．089厥g 成中医界的共识[州。然而，糖尿病肾病的瘀血阻络证候尚未 体重(相当于饮片4．7以g体重)给予化瘀通络中药灌胃治疗， 得到实验室指标的充分验证。本实验意在通过观察糖尿病肾 其余各组给予相应体积的饮用水灌胃。 病瘀血阻络相关指标的变化，应用现代医学的方法验证瘀血 5．标本留取及观察指标观察大鼠的一般状态，于腹腔 阻络证型的存在。 注射sIZ前及注射后16周末，测量各组大鼠的体重，并在注 材料与方法 射后72h以及后期不定期测量大鼠的血糖。于16周末，准确 1．实验动物健康雄性sD大鼠，体质量80—1009，由河 计量24小时饮水量及尿量，收集24小时尿液，离心取上清， 北医科大学实验动物中心提供(许可证号：scXK(冀)2008— 检测24小时尿蛋白定量。经禁食不禁水12小时后，大鼠麻醉 1一003)。室温22～24℃，湿度50一60％的环境下，大鼠自由饮 后开腹，腹主动脉取血，待检测血脂及血流变指标。快速取出 食。 肾脏，剥去被膜，称取右侧肾重，并留取肾皮质组织，经甲醛一 2．高糖高脂饲料配制普通全价颗粒饲料(热量为3． 冰乙酸一乙醇固定液(FAA)固定，以备光镜检测。 51kc础g)基础上添加猪油、蛋黄粉、绵白糖、胆固醇、胆酸盐， 6．统计学方法 热量为4．43kca№。 采用SPSSl7．O统计软件包进行统计分析，所有资料以均 3．化瘀通络中药中药颗粒剂：丹参(1．89／袋，相当于数±标准差(茗±s)来表示，各组数据先进行方差齐性检验。若 饮片10