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DNA重组技术的基本工具2.doc
【课 题】专题一——基因工程——第1.1 DNA重组技术的基本工具
【教学目标】1.简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用;2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
【教学流程】
回忆:萤火虫可以自行发光。道路两旁路灯整晚会消耗大量的用电,而一般的道路两旁同时栽种大量的行道树。针对这种情况,如果要用基因工程技术创造出一种荧光树,大致的步骤应该如何操作? 在这一过程中要使用哪些工具?
应用:下图为科学家培育抗虫棉的过程,据图回答:
问题(1):在此基因工程操作过程中,①过程需要使用到哪种工具?它有什么特点?此工具作用的结果是否一样?
问题(2):在上图所示过程中是否还有其他地方会使用到此种工具?
例题1.如图所示为一种限制酶切割DNA分子:
(1)这种限制酶切点是 间,形成
个黏性末端,其特点是
。
画出限制酶切割此DNA分子形成黏性末端的过程图:
(2)此限制酶识别特点是 。
(3)如果G碱基发生基因突变,可能发生的情况是: 。
问题(3):过程②需要借助于基因工程中的哪种工具?有哪些种类?作用特点是否有差异?
想一想:DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?
例题2.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗?以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:
(1) …CTGCA??? (2) …AC??? (3) GC… (4) …G???? ? (5)????G…? (6) …GC
…G??????????? …TG??????? CG… …CTTAA???? ACGTC…?? ??? …CG
(7) GT…???????(8)AATTC…
CA…??????????? G…
你能用DNA连接酶将它们连接起来?
和能连接形成 和能连接形成???????????? ; ;
和能连接形成 和能连接形成???????????? ; (1)绿色硬纸板(甲DNA分子)的碱基序列为:
……ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC……
……TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG……
红色硬纸板(乙DNA分子)的碱基序列为:
……TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC……
……AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG……
其中, DNA分子含有“目的基因”, DNA分子是“质粒”。
(2)用“剪刀”进行切割。酶切位点在 (a处还是b处),此化学键称为 。
(3)请用“||”在甲、乙两DNA分子上标出EcoRI的作用位点。
(4)你模拟插入的DNA片断能称得上一个基因吗? 。EcoRI属于 酶。
【巩固训练】
1.实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序,切点在G和A之间,这是应用了酶的A.酶的高效性 B.酶的专一性 C.酶的多样性 D.酶的催化活性受外界条件影响
2.以下说法正确的是
A.所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列
B.质粒是基因工程中惟一的运载体
C.运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D.基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复
3下列黏性末端属于同一种限制性内切酶切割的是A.①②
B.①③
C.②④
D.③④
.不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A.能复制 B.有多个限制酶切点C.具有标记基因 D.它是环状DNA
.基因工程技术也称为DNA重组技术,其实施必须具备的四个必要条件是
A.目的基因 限制性内切酶 运载体 体细胞
B.重组DNA RNA聚合酶 限制性内切酶 连接酶
C.工具酶 目的基因
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