坐骨神经腓肠肌标本制备.docVIP

坐骨神经-腓肠肌标本制备 →毁髓→剥制后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→游离股骨头→标本检验→电刺激极性法则的验证 2、双毁髓 一只手握住牛蛙，使其背部向上。用拇指压住牛蛙背部，食指按压其头部前端，另一只手持毁髓针，由两眼之间沿中线向下触划，触及凹陷处即为枕骨大孔。将毁髓针垂直刺入枕骨大孔。将针尖向前刺入颅腔内搅动，此时为单毁髓；将毁髓针退回枕骨大孔，针尖转向后方，与脊椎平行刺入椎管内捣毁脊髓，完成双毁髓。 3、坐骨神经-腓肠肌标本制备 剥制后肢标本:轻提双毁髓蛙，自背面耻骨联合上方约1公分处横向剪断脊柱。轻轻托起后肢，看清坐骨神经位置，沿脊柱两侧横向切口剪断体壁，去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。 分离两后肢：用粗剪刀纵向剪开脊柱，并剪断两后肢相连的肌肉，一只用于剥制标本，一只放入任氏液中保存。 分离坐骨神经：将后肢标本脊柱端腹面向上，趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝，但不要伤及神经，其分支待以后用手术剪剪断肌肉。 游离腓肠肌：同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离并在其跟腱处穿线、结扎； 分离股骨头：捏住股骨，剪去并刮净周围肌肉， 保留股骨的后2/3，剪断股骨; 检验标本：用手术镊轻提标本的脊椎片，再用经任氏液蘸湿的锌铜弓接触坐骨神经，如腓肠肌发生收缩，则表示标本机能正常。轻提腓肠肌上的结扎线，将标本放入任氏液中保存15-20分钟后进行实验。 电刺激的极性法则验证：用棉线在神经干中间部位进行结扎，以阻断神经传导兴奋的能力。用锌铜弓跨越结扎线刺激坐骨神经干。使锌极在腓肠肌一端刺激，观察腓肠肌收缩发生在通电（接触神经干）时还是断电（离开神经干）时；调转锌铜弓的极性，使铜极在腓肠肌一端刺激，观察腓肠肌收缩实在通电时还是断电时。比较不同极性电极刺激时腓肠肌的收缩强度是否一样，那个收缩强度比较大？ 注意事项 1、避免血液污染标本，压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械触碰神经干。 2、在操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。 3、标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。 实验结果 通过任氏液浸泡，刺激后，看到肌肉有收缩的反应，调换电极进行刺激后也同样有收缩反应。通过铜—锌与锌—铜的两种刺激比较后，铜—锌更强。 总结 通过本次试验更加深刻的认识了肌细胞收缩的机制，熟悉了单毁髓与双毁髓的方法和操作，掌握l坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠 肌标本的制备方法的基本操作。由于实验过程中提取腓肠肌时候，肌肉过度兴奋，进行电极刺激时现象不是非常明显。 综上所述实验时需小心操作，尽量避免肌肉失活。 八、思考题 1、剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？ 答：不能。因为自来水中还有例如氯离子、钙离子等许多离子，它们会影响细胞膜的点位分布，最终就会影响到刺激反应现象的观察；另外自来水里有许多微生物如果它们附着与誓言材料上，也会影响实验效果的。 2、金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌，可能引起哪些不良后果？ 答：金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌会损伤腓肠肌细胞膜，使肌肉中的神经收到过度刺激，而过度兴奋最终失活，刺激时候就没有现象。 3、如何保持标本的机能正常？ 答：首先在制备腓肠肌的过程时，金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌，以及实验者不要触碰到肌肉；其次，过程中要保持腓肠肌的湿润，常加任氏液，最好先泡一会；另外，在第一次电刺激后，需要让肌肉休息一段时间，在进行下一次刺激。 实验一 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备 一、实验目的 掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本基本操作技术，掌握蛙类手术器械的使用方法。 二、材料和方法 1、材料 蟾蜍；任氏液；探针、剪刀、培养皿、瓷盆、玻璃分针、蛙板、玻璃板、大头针、镊子、线、锌铜弓。 2、实验方法 2.1 毁脑脊髓 取蟾蜍一只，用左手握住，以食指压其头部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。此时蟾蜍下颌呼吸运动应消失，四肢松软，即成为一毁脑脊髓的蟾蜍。否则须按上法再行捣毁。 2.2剪除躯干上部及内脏 用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手将粗剪刀沿两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷盆内。 2.3剥皮 避开神经，用右手拇指和食指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。拉至大腿时，如阻力较大，可先剥下一