染色体畸变试验中CHL细胞系／剂量法则的应用1).pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing) 6(6）：26-28＿t984 染色体畸变试验中CHL细胞系／剂量法则的应用’‘ 普 夺 尹 少、 ,勺， .曰 （卫生部药品生物制品检定所，北京） 为了检测化学物质的遗传毒性和潜在致癌 CHL-I细胞培养3天后，分别加人不同剂量的 性，所采用的方法应是简单、快速、经济、敏感和 化学药剂，加药后24,48小时收获细胞。按常 重复性强。传代的哺乳动物组织培养细胞，特别 规制备染色体，对照采用溶媒及未处理组。 是中国仓鼠肺细胞 （简称CHL细胞）正具备着 在油镜下，每一剂量组计数 100个中期细 这些特点。Ishidate[31自1977年起成功地用CHL 胞，观察染色体畸变。畸变类型分5种： 染 细胞系统作为一种非常有用的工具，检测环境 色单体型间隙g（)，染色单体型断裂(b)，染色单 中的化学物质，并发现不少新的诱变剂[4-710我 体型易位 (t)，环状染色体 (r（)，碎片或粉碎化 们用 CHL系统观察化学物质所诱发的染色体 (f)。也计算多倍体 P（)的发病率。染色单体 畸变，获满意结果。 内不着色的长度小于染色单体的宽度作为间 隙。根据日本NIHS经验，间隙不计人总的畸变 材 料 与 方 法 率。 一（）培养细胞 中国仓鼠肺细胞克隆 （五）结果的判断 CHL-I细胞的自发 亚系CHL-1，由日本东京国立卫生试验所诱变 染色体畸变率通常小于2-4 ，因此判断如下： 剂部赠送。 该细胞系由东京肿瘤研究所的T. 畸变率小于4.9多为阴性 一（），介于5.0-9.9肠 Utakojilsl建株，染色体的原始核型为25，核型稳 为可疑 （士），介于10-19.9务为弱阳性 （十）， 定，37℃单层培养，培养液为EAGLEMEM 介于20.0-49.9沁为阳性 料（），大于50务为强 （日本产）及 10并小牛血清，每周传代2次，传 阳性 姗（）。从24小时或48小时收获细胞的畸 至200多代其核型仍基本保持不变。 变率大于10多以上，并有剂量反应关系时判断 二（）化学药剂 柔毛霉素D（aunomycin), 为阳性，少许化学药剂若没有明确的剂量反应 意大利产；丝裂霉素C(MitomycinC，日本产； 关系，则测定该剂量的可重复性。 甲基亚硝基K(N-Met场1-N-Nitro-N-Nitrosogu- 结 果 anidine)，瑞士产。4一硝基唆琳 (4-Nitro-Cninolin- N-Oxid)，瑞士产。以上化学物质均分析纯。聚 一（）50 细胞生长抑制试验 各种化 乙烯醇 (PolyvinylAlcohol)，北京有机化工厂生 学药剂抑制50务细胞生长的浓度是不同的表（ 产。 1)。 其中致突变／致癌剂柔毛霉素、丝裂霉素 三（）50务细胞生长抑制试验 以6X C,4-硝基哇琳和甲基亚硝基肌基本接近，在 10/m1的CHL-1细胞培养3天后，分别加人不 1-4z1g/ml范围内，而聚乙烯醇则高达5001zg/ 同剂量的化学物质，作用48小时后，固定，结晶 m1o 紫着色，检查着色细胞，观察抑制50％细胞生 HuangNianjun;ApplicationofCHLCellLineand 长的剂量。对照用溶媒及未处理组。 Dose-ruleinCbromosornalAberrationAssay 四‘）染色体畸变试验 以4X103/ml的 1)赵强同志参加部分实验，特此致谢。 26