SPHK1和HIF-1a蛋白共表达与胃癌发生、转移和预后相关性的研究.pdf

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………．．1 英文论著摘要……………………………………………………………………．．4 二、英文缩略语………………………………………………………………………．．7 三、论文 肓{f言…………………………………………………………………………………………．………………．8一日U吾…………………………………………………………………………………………．………………． 实验方法…………………………………………………………………………．．8 实验结果…………………………………………………………………………．12 讨论…………………………………………………………………………………………………………：!() 结j沧…………………………………………………………………………………………………………23 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………24 五、参考文献…………………………………………………………………………25 六、附录 综j丕…………………………………………………………………………………………………………28 在学期间科研成绩………………………………………………………………4l 致{射…………………………………………………………………………………………………………42 个人简介…………………………………………………………………………43 ·中文论著摘要· SPHKl和HIF．1 Q蛋白共表达与胃癌发生、转移 和预后相关性的研究 目 的 本研究采用免疫组化方法，通过检测正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎、肠上皮 化生、异型增生及胃癌组织中SPHKl和HIF．1Q蛋白的表达，分析两者表达的差 异性和相关性，并探讨二者表达与胃癌发生、转移及患者临床预后之间的关系和 临床病理意义。 乃 活 临床病例资料收集及组织芯片制作：收集中国医科大学附属第一医院肿瘤外 科手术切除胃癌标本254例(其中205例距癌灶边缘大于5cm处取配对正常胃黏 膜作为对照)，慢性萎缩性胃炎43例，肠上皮化生107例及异型增生17例。常规 石蜡包埋，组织蜡块行4lxm组织切片，常规HE染色，用于目标组织的定位。采 用组织芯片制作仪构建胃癌及癌前病变组织芯片蜡块，行4lxm连续切片。 免疫组化染色及结果判定方法：采用PV-9000免疫组化二步法检测正常胃黏 膜、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌中SPHKl和HIF．1a蛋白的 人HIF．1a单克隆抗体购自SantaCrzu公司，工作浓度1：20，免疫组化及DAB显 色试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司。用PBS代替一抗做阴性对照。结果判 定：SPHKl和HIF．1a蛋白在细胞浆呈现清晰棕黄色特异性免疫反应颗粒为阳性 细胞。每一病例随机选择2个高倍镜视野，计数200个细胞，阳性细胞占计数同 为3分，75％为4分。染色强度以阳性细胞呈色反应为准：无特异着色为0分， 浅黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；然后按染色强度和阳性细胞所 占的百分比的乘积将结果分为：0分为阴性(一)；l～4分为弱阳性(+)；5～8分 为中度阳性(++)，9～12分为强阳性(卅)。 结 果 (82．4％)和胃癌组织(60．6％)中表达的阳性率均显著高于正常胃黏膜(22％)， P0．05。SPHKl蛋白的阳性表达率在肠上皮化生、异型增生及胃癌各组之问差异 未见相关，P0．05。 白的阳性表达率在肠上皮化生、异型增生及胃癌各组之间差异均无统计学意义 胃癌患者性别、年龄、WHO组织学分型、Lauren分型和浸润深度未见相关 (氏O．05)。 患者五年生存率(50．0％)，生存时间分别为31．0+2．586months和46．0±2．678 months，差异有统计学意义(P=-0．034，log．rank检验)。 结论 SPHKl和HIF．1a在胃癌和癌前病变中的过表达提示其在胃癌发生、浸润和