寡核苷酸阻断ROCK1蛋白对人卵巢癌细胞恶性行为的影响.pdfVIP

虫堡旦生擅基盍2鱼盟生!旦且簋垫盘苤!Q塑些也j旦!型：鱼!!逝!!塑，!世望：基!：!墅 723 。基础研究． 寡核苷酸阻断ROCK．1蛋白对人卵巢癌细胞 恶性行为的影响 韩志强洪振亚胡春霞胡轶陈彩虹卢运萍王世宣周剑峰马丁 【摘要】 目的通过反义寡核苷酸(AsoDN)对RocK—l的特异性阻断．探讨R()cK．1蛋白在卵 巢癌转移中的作用。方法将R0cK一1反义寡核苷酸(AsODN)以脂质体介导，转染人卵巢癌细胞系 sW626和c肿v_3细胞．采用逆转录聚合酶链反应(RT—PcR)与w明t∞1b10t印迹法，检测转染前后 ROcK-l蛋白的表达，Boyden小室观察ROcK一1As0DN对sW626和c肿v-3细胞侵袭厦迁移能力的影 响，采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)比色法，测定转染前后细胞增殖及黏附能力的变化。结果转 染R0cK·lAs0DN后，2株细胞内ROcK-1蛋白的表达明显减少，最大抑制率可达49．0％；细胞的侵 袭能力受到明显抑制，10¨JnoI／L组和20斗咖L，L组sw626细胞的侵袭能力分别为对照组的75．6％+ 38％和54．7％±2．9％，c岫v_3细胞为68．8％±4．7％和50．0％±4．5％；转染2种浓度As0DN的 sw626和c∞vo细胞的随机运动能力分别为对照组的80．o％±1．3％、63．7％±1．9％、72．0％± 1．3％和55．9％±2．5％；定向运动能力分别为对照组的83．9％±1．4％、64．1％±1．3％、72．5％± 3．4％和54．5％±1．9％。转染后2株细胞的体外黏附能力和增殖能力，均未显示出明显的变化。结 论RocK．1蛋白的表达与人卵巢癌细胞的体外侵袭和迁移密切相关，阻断RocK．1的表达。可有效 地抑制卵巢癌肿瘤细胞的转移。 【主题词】 G蛋白Rh0；RocK一1蛋白；卵巢肿瘤 EⅡ跚of G bloddng0f舯CK-1．蚰胡酣眦0f鲫nallpr岫助o。咖themaU印硼‘behavi盯0f ovari粕tⅡm盯∞№invitm 删^，删一咖，加ⅣC踟n一佃，Hu吼帆一，缸，日UH，C删血f—b昭， Lu地n叫增，吼Ms^i叫∞n，z肿uJ缸州§昭，胍{踊7罾凸甲们脚哪0，0㈨血l＆0抛∞研，％嚼i 胁如耐cDne伊，胁砒蜡￡mi删计0，缸n钟肌d‰h聊￡q盯，阢‘hn档D∞D．矾机Ⅱ ‰P0础增。叫kr：m∞蟮，E—m“：拥口@驰．咖“．砒．饥 To me roleorRocK．1inova五帅c毗他erinvasi蚰帅d 【Abst叫】obj硎veinv憾d鼬kp0BBible ceUlir瞄medinled met鹏tBBiB．MethodsROCK．1As0DN栅st瑚sfe毗edi呦Sw626andCa。v-3 by o“20001he RocK．1mRNAand hyR1：PCR肌d Ij叫kt哪ine expressio岫0f p咖einwe坤山t黜ted 0f ASODNont}Ieinva面on卸d Wegle丌l-bh舳sav．B0vdenchanlberw船usedto胡BesBthee扦edROCK一1 0fl}lecellli嬲．The theadhesionaIld oftlletmnsfectedce儿s’屺re mi#”ddn chn日∞in prolifera‘ion detectedbyMTT level0fROCK-1mRNAand int|lecelllin器we陀 aBsay．R船unsThe帆pr∞sions pmt刨n dec瑚sed ald帽朗0f 8nd RocK一1AsoDM矾∞ Bi印i6c卸tIv柚er咖sfe毗ion1