氨基甲酸酯类农药速灭威人工抗原的合成与鉴定.pdfVIP

现代食品科技 ModernFoodScienceandTechnology 2009，Vo1．25，No．10 氨基甲酸酯类农药速灭威人工抗原的合成与鉴定 孙晶玮，王硕，张燕 (天津科技大学 食品工程与生物技术学院 教育部食品营养与安全重点实验室，天津300457) 摘要：通过化学方法合成了两种完全突出氨基甲酸酯类农药速灭威特征结构的半抗原，并采用活化酯法与载体蛋白偶联制备成 完全抗原。经动物试验鉴定合成的人工抗原可制备出高效价的抗速灭威抗体，结果表明速灭成人工抗原已成功合成，为建立速灭威残 留免疫分析方法奠定了基础。 关键词：速灭威；半抗原；表征；完全抗原；鉴定 中图分类号：TQ453．2；文献标识码：A；文章篇号：1673—9078(2009)10．1183—04 SynthesisandIdentificationofArtificialAntigensforN-methylcarbamate InsecticideM etolcarb SUN Jing-wei，W ANG Shuo，ZHANG Yan (KeyLaboratoryofFoodNutritionandSafety,MinistryofEducationofChina，TianjinUniversiytofScienceand Technology,Tianjin300457，China) Abstract：TwohaptensforN-methylcarbamateinsecticidemetolcarbweredesignedandsynthesized．Bothhaptenswereconjugatedtothe carrierproteinsrKLHorOVA)byhteactiveestermehtod．HaptenswereconjugatedwihtKLHofruseasimmunogensandcoupledtoOVAofr useascoatingnatigens．Theconjugateswereidentifiedcouldproducehightiterantiseraofrmetolcarb．Theresultsshowedhtesuccessful synhtesisofartificialnatigensofrmetolcarbwasuseuflofrhtedevelopmem ofimmunosorbentassayofmetolcarb． Keywords：metolcarb；hapten；characterization，natigens；identification 速灭威 (Metolcarb，3一甲苯基_N一甲基氨基甲酸酯) 本试验设计合成了二种速灭威半抗原，该合成方 是一种氨基甲酸酯类杀虫剂，广泛应用于稻田、蔬菜、 法具有操作简便安全等优点。合成的速灭威半抗原连 水果及经济作物等的害虫防治 1【]。虽然速灭威的危害 接匙孔血蓝蛋白制备出具有免疫原性的人工抗原，经 性很小，对哺乳动物的半致死量 (以小鼠计)为 268 鉴定合成的两种人工抗原能促使免疫动物产生针对速 mgk／g[2J，但农产品上残留的速灭威农药仍会对人体健 灭威的抗体，为建立一种简便、快速、特异性的速灭 康造成潜在的危害。因此开发速灭威农药残留的痕量 威残留免疫分析方法奠定了基础。 分析方法具有重要的现实意义。 1 材料与方法 速灭威的传统检测方法主要是色谱法3【-6l，这些方 法虽然灵敏、准确，但也存在着样品前处理过程复杂、 1．1 材料与仪器 不适合大批量样品筛选的缺陷。目前，较为先进的农 匙孔血蓝蛋 白 (KLH)、牛血清 白蛋白 (BSA)、 药残留检测法是酶联免疫吸附分析 (ELISA)，因为它