蚜虫基因组DNA提取方法的改进.pdfVIP

( ) 　 ·880 · 昆虫知识 　Chinese Bulletin of Entomology 2006 43 6 蚜虫基因组 D NA 提取方法的改进 杨子祥 　陈晓鸣 　冯 　颖 　缪迎春 ( 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 　云南 昆明　650224) Method improvement for extraction genomic D NA from aphids. YAN G ZiXiang , CHEN XiaoMing , FEN G Ying , MIAO YingChun ( Research Institute of Resource Insects , Chinese Academy of Forestry , Kunming Yunnan 　 650224 , China) Abstract 　The traditional SDS method was modified for the isolation of the genomic DNA from aphids with small body and surface covered by exoskeleton . Compared with the traditional SDS method , this simple and effective method avoids grinding tissue and is suitable for the extraction of DNA from single aphid. Genomic DNA prepared by this new method is suitable for PCR amplification using RAPD random primers and sequencing primers. Key words 　aphid , genomic DNA , extraction , improvement 摘 　要 　蚜虫基因组 DNA 的提取是蚜虫分子生物学研究中的难点 。参照动物基因组 DNA 的提取方法 , 根据蚜虫体型微小 ,体表有外骨骼的特点 ,对 SDS 法作了改进 。改进的方法无需用组织捣碎棒破碎虫 体 ,操作简便 。与现在常用的提取方法相比 ,改进的 SDS 法能快速 、有效地提取单头蚜虫的基因组 DNA , 适用于 RAPD 随机引物和测序引物的 PCR 扩增 。 关键词 　蚜虫 ,基因组 DNA ,提取方法 ,改进 　　运用分子生物学技术从核酸水平研究昆虫 信息含量丰富等优点 , 非常适合于蚜虫的研 的分类和鉴定 、生物型的识别 、遗传多样性分析 究[7 ] 。蚜虫基因组 DNA 的提取是开展蚜虫分 等 ,是现代昆虫分子系统学和昆虫遗传学的研 子遗传学研究的难点 ,Black 等采用了 SDS 法提 究热点之一 ,开展这类研究的基础工作是基因 取蚜虫基因组 DNA 并用于 RAPD 扩增[8 ] ;杨效 组 DNA 的提取[ 1] 。在昆虫分子遗传学研究中 , 文等在烟蚜 Myz us persicae ( Sulzer) 的研究中采 由于研究的样本量较大 , 除了要获得质量和数 用 KAC 法提取烟蚜的DNA[9 ] ;安瑞生等对 KAC 量合乎要求的DNA 外 ,还需要提取方法简便易 法做了改进[ 10 ] ; 以后的蚜