CEMB HCL为色原的酶法测定血清肌酐试剂盒的评价.pdfVIP

2011年第 27卷第 1期 包 头 医 学 院 学 报 V01．27 No．1 2011 JOURNALOFBAOTOUMEDICALCOLLEGE 3l CEMBHCL为色原的酶法测定血清肌酐试剂盒的评价 唐金玉 崔四放 李海林 (上海杨思医院检验科 ，上海200126) 摘 要 目的：评价 以N一(2一carboxyethy)一N—ethyl—m—toluidine盐酸盐 (CEMBHCL)为色原的酶法肌酐 (Cre) 试剂盒的灵敏度和显色稳定性。方法 ：采用CEMBHCL为色原酶法测定血清Cre，并对精密度、线性范围、干扰因素及相 关性进行分析。结果：精密度批内变异系数(CV)为 1．27％～4．33％，线性达 13472t~mol／L，r=0．985。上海市临床 检验中心质控血清测定偏差值≤1．02％，当胆红素~684p,moi／L、血红蛋白≤5g／L、维生素 C(抗坏血酸)≤2o0ms／L、 乳糜 ≤3000时对本法无干扰。结论：采用 CEMBHCL为色原的酶法测定血清肌酐的方法特异性好，灵敏度高，结果准 确 ，有一定推广价值。 关键词 肌酐；酶法；色原；评价 Jaffe法是测定血清肌酐 (Creeatinine，Cre)的传统 剂盒测定血清 Cre，做 2O次测定。SD分别为4．48、 方法，但干扰因素较多，影响颇大…。近年来，酶法测 5．66，CV值分别为4．33％、1．27％。 定技术的应用 明显减少 了反应的干扰，且特异性高。 2．2 线性测定 按照直线线性实验原理及实验方法 肌酐酶法 以Trinder反应为指示系统，但色原物质不同 测定 10组不同浓度的Cre水溶液，每组测定2次，求 导致灵敏度差异很大，目前常用的色原物质有 3，5二 其相对值，相对值在95％ ～105％为有线性，结果显 氯一2一羟基苯磺酸(DHBA)、N一乙基 (2一羟 一3一 示 Cre浓度 高达 13472~mol／L时，线性 良好， 磺丙基)一3，5二 甲氧基 一4一氟苯胺 (F—DAOS)、N 详见表 1。 一 (2一羟 一3一磺丙基)一3，5一二 甲氧基苯胺 (HD— 表 1 高值肌酐水溶液线性测定 (i~mol／L) AOS)L2-3]。日本世诺株式会社推 出的Cre试剂盒采 用 CEMBHCL(N一2一羟一N一乙基 一1TI一甲苯胺)为 显色剂，产生深红色色素，提高了反应的特异性和灵敏 度 ，使显色更稳定，为此笔者对该试剂盒做了一些方法 学评价。 1 材料与方法 1．1 仪器与试剂 仪器为迈瑞东芝 一120全 自动生 化分析仪。试剂为 日本世诺生产的Cre(酶法)试剂 盒，主要成份为R1：肌酸脒基水解酶(CRE)，肌氨酸氧 化酶(SAO)，N一(2carboxyethy)一N—ethyl—m—tolui— dine盐酸盐 (CEMBHCL)；R2：肌酐 胺基 水解 酶 (CREN)，4一氨基安 替 比林 (4AA)，过氧化物 酶 2．3 干扰物质的影响 按照干扰物质试验原理及实 (POD)。对照试剂是罗氏公司Cre(酶法)试剂盒。质 验方法，测定以混合血清作为稀释液得到的干扰物质 控品由上海市临床检验中心提供，批号为 M901761， 系列样本，分成 5组，每组分别加入游离胆红素、抗坏 M901762。 血酸、结合胆红素、血红蛋 白、乳糜 ，测定血清中的Cre 1．2 方法 严格按照试剂盒说明书进行测定，并采用 含量 。以0／5稀释点的标本 (无外来添加干扰物 SPSS11．0统计软件对实验数据进行统计学分析。 质)为基准值，记作 100％，求出测定值与基准值的 2 结果 比，即干扰度 ，以此来判断受干扰的程度，一般划定 2．1 精密度测定 选择 1份低浓度血清标本和 1份 90％一110％为无干扰区间，若超过此区间则认为受 高浓度血清标本，采用 CEMBHCL为色原酶法肌酐试