沙丁胺醇直接酶联免疫快速检测的方法.pdfVIP

霞品研究与开发 2011年 2月 检测分析 FoodResearchAndDevelopment 第32卷第2期 97 ===一 沙丁胺醇直接酶联免疫快速检测的方法 王俊平，赵云襄，王硕 ，殷慧玲 (天津科技大学食品营养与安全教育部重点实验室，天津300457) 摘 要：沙丁胺醇与瘦 肉精同属于禁用的饲料添加剂，可以在动物体 内大量残留，人体过量摄入会引起中毒反应。为 了建立沙丁胺醇的快速检测方法，从硫酸沙丁胺醇出发制备了半抗原沙丁胺醇丁二酸衍生物，用混合酸酐法将半抗 原与载体蛋 白一钥孔嘁血蓝蛋 白(KLH)偶联作为免疫抗原制备了沙丁胺醇的多克隆抗体 ，建立了沙丁胺醇直接竞争 酶联免疫检测方法 ，该方法抗体最佳包被抗体量为 1 g孔／ ，酶标抗原稀释 比例为 1：16000，掩蔽剂采用脱脂奶粉。所 建立的方法具有很高的灵敏度和特异性，Ic 为0．90ng，mL，IC。达到了0．05nmL，远低于国家残留限量标准，与沙丁 胺醇的结构类似物基本没有交叉反应。 关键词：沙丁胺醇；多克隆抗体；直接竞争酶联免疫 DevelopmentofanEnzyme-LinkedImmunosorbentAssayfortheDetectionofSalbutamol WANGJun—ping，ZHAOYun—xiang，WANGShuo，YINHui—ling (KeyLaboratoryofFoodNutritionandSafety，MinistryofEducation，TianjinUniversityofScienceTechnology，Tianjin 300457，China) Abstract：A reliableELISA methodbasedonpolyclonalfortheanalysisofsalbutamolhadbeendeveloped． AntibodywithhighaffinityandspecificitywasobtainedafterimmunizationofrabbitswithSalbutamol-KLH．The assayconditionswereoptimizedandthecross-reactivityagainstractopamine，dobutamineandisoxsuprinewas low．IntheCD-ELISA，Salbutamol-HRPdilutingmultiplewas1：16000，IC5owas0．90ng／mLandICl5was 0．05ng／mL，whichislowerthanotherrepots． Keywords：salbutamol；polyclonalantibody；ELISA 沙丁胺醇(Salbutamol，缩写 SAL)，又名舒喘宁 、索 症状 ，有可能危及生命[1J。2002年我国农业部、卫生部 布氨 、阿布叔醇等 ，与盐酸克罗特仑 、莱克多巴胺一样 公布沙丁胺醇、西马特罗 、特步他林、克伦特罗 、莱克多 是一种苯酚胺类 6一肾上腺素激动剂，化学名为 1一(4一 巴胺 、多巴胺 6种 32-类兽药禁用 ，并且在肉品中的限 羟基一3一羟 甲基苯基)一2一(叔丁氨基)乙醇。 量要求是不得检出，即含量小于等于0．1~g／kgf”，因此 沙丁胺醇由于其生产成本低廉 ，又具有营养再分 对该药的使用情况进行监控十分必要。 配作用 ，可明显提高瘦 肉率 ，作为一种新型促生长添 检测是控制该药滥用的有效手段，目前沙丁胺醇 加剂在畜产品生产中使用，尤其是当 瘦“肉精”克伦特 常用的检测方法有液相色谱法 、液相色谱法一质谱法 、 罗全面禁止使用后 ，沙丁胺醇便成为畜产品生产中兽