碱性成纤维细胞因子在博莱霉素致肺纤维化肺血管损伤中的作用.docVIP

碱性成纤维细胞因子在博莱霉素致肺纤维化肺血管损伤中的作用 　　作者：刘华,陈利萍,朱新菊,贺永锋,赵杰,刘新　　作者单位：北京市公安局，北京 ;西安交通大学医学院法医系，陕西西安 ;镇江市公安局刑侦支队，江苏镇江 ;陕西省公安厅刑侦局，陕西西安 　　【摘要】 目的 探讨碱性成纤维细胞因子(bFGF)在博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化肺组织中的表达及其在肺血管损伤中的作用。方法 于大鼠气管内注射BLM以复制其肺纤维化模型,应用bFGF多克隆抗体按SABC法行免疫组织化学染色,定量图像分析。结果 BLM组动物支气管上皮细胞胞浆内、支气管和肺小动脉肌层以及肺泡巨噬细胞胞浆内可见较多棕黄色细颗粒状bFGF阳性表达产物,显著高于对照组(P0.05)。结论 在BLM致大鼠肺纤维化过程中bFGF表达上调，提示bFGF可能参与肺间质纤维化的发病过程。 　　【关键词】 碱性成纤维细胞因子,博莱霉素,肺纤维化;血管损害;免疫组化 　　ABSTRACT: Objective To explore the expression of basic fibroblast growth factor(bFGF) in pulmonary tissues of rats with bleomycininduced pulmonary fibrosis and the role of bFGF in vascular injury. Methods Pulmonary fibrosis was induced in rats by intratracheal injection of bleomycin(BLM). Lung expression of bFGF proteins was assessed by SABC immunohistochemistry using bFGF monoclonal antibody and quantitative image analysis. Results The expression of bFGF in the lung tissues of BLM group was mainly distributed in bronchiole epithelial cells, muscular layers of bronchi and arterioles, and alveolar macrophage. It was higher than that in control group, with significant difference (P0.05). Conclusion The upregulation expression of bFGF in the BLMinduced pulmonary fibrosis indicates that it directly participates in the process of pulmonary fibrosis. 　　KEY WORDS: basic fibroblast growth factor (bFGF); bleomycin; pulmonary fibrosis; vascular injury; immunohistochemical method 　　肺间质纤维化是一种病因各异、表现相似的疾病谱，是各种弥漫型肺间质疾病的最终表现形式，其主要病理特点是肺内成纤维细胞过度增殖和细胞外基质的过多聚集。肺间质纤维化一旦形成，将不可逆地导致严重的甚至致命的呼吸循环功能障碍。有关肺纤维化发生的机理已有了较为深入的研究，但纤维化过程中肺组织、血管的损伤机制尚不清楚。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)具有强大的促进细胞分裂增殖的作用[1]，是各种原因所致肺间质纤维化形成机制研究的重点对象。在本研究中，我们应用免疫组织化学技术结合图像分析，观察博莱霉素(bleomycin, BLM)致大鼠肺组织纤维化中肺组织bFGF的表达，从血管损伤方面探讨bFGF在BLM致肺间质纤维化的发病机制中的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物及分组 体重200-250g的健康雌性Wistar大鼠60只，由西安交通大学医学院实验动物中心提供。随机分为BLM组和生理盐水对照组，每组30只。 　　1.2 肺纤维化模型的建立 BLM组用戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，在无菌操作下作颈部正中切口，逐层暴露气管，用lmL注射器(前带7号针头)抽取含BLM(5mg/kg)的生理盐水0.2-0.3mL，经两气管软骨环间隙朝向心